HANS针刺对海洛因成瘾大鼠海马CREB表达及细胞凋亡的影响

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目的:观察HANS针刺对海洛因成瘾大鼠学习记忆、海马CREB和p-CREB表达及海马神经细胞凋亡的影响,初步探讨其作用机制,为针刺戒毒提供一定的理论依据。 方法:54只Wister大鼠随机分为对照组和实验组,实验组又分为海洛因成瘾组(简称成瘾组)和海洛因成瘾后自然戒断针刺组(简称针刺组),按剂量递增原则,给Wister大鼠皮下注射海洛因,1日2次,连续9天,第10天用纳洛酮催促戒断,确定海洛因成瘾模型的建立。对照组以同样方式注射等量生理盐水。成瘾组继续给海洛因维持量(27mg/kg)5天,针刺组则停止给药,给予HANS针刺(每天1次,连续5天)。三组(对照组、成瘾组、针刺组)各自进行跳台实验测试大鼠学习记忆,石蜡切片HE染色光镜下观察海马神经元形态及数量的变化;免疫组化法检测各组大鼠海马CREB、p-CREB的表达,流式细胞仪检测海马神经细胞凋亡。结果:1.建立的海洛因成瘾模型组大鼠催促戒断症状的评分符合海洛因成瘾模型评分标准,并且实验组和对照组大鼠的戒断评分有显著性差异(P<0.01)。2.跳台试验结果表明:成瘾组和对照组大鼠比较,反应时间及累积电击时间均延长(P<0.01),跳台潜伏期缩短(P<0.01),错误次数增加(P<0.01);针刺组和成瘾组大鼠比较,反应时间及累积电击时间缩短,跳台潜伏期延长,错误次数减少(P<0.01)。3.免疫组化结果显示:与对照组比较,成瘾组大鼠海马CA1区、CA3区、DG区CREB、p-CREB表达增强(P<0.05);针刺组大鼠海马CA1区、CA3区、DG区CREB、p-CREB表达显著增强(P<0.01)。4.流式细胞仪结果显示:与对照组相比,成瘾组大鼠海马细胞凋亡率增加(P<0.01),针刺组大鼠海马神经细胞凋亡率较成瘾组降低(P<0.05)。 结论:1.海洛因成瘾引起大鼠学习记忆下降;2.海洛因成瘾可使大鼠海马CA1区、CA3区、DG区CREB、p-CREB表达增强,针刺使CREB及其磷酸化水平进一步升高,提示p-CREB参与大鼠海马学习记忆过程;3.海洛因成瘾大鼠海马神经细胞凋亡增加;HANS针刺治疗可抑制海洛因引起的海马神经细胞凋亡;4.海洛因引起海马神经细胞凋亡可能是海洛因损害学习记忆的机制之一,HANS针刺治疗可改善海洛因成瘾大鼠的学习记忆。
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