【摘 要】
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一、研究目的 本研究采用人外周血分离单核细胞,体外培养树突状细胞(dendritic cell,DC),Her-2/neu基因重组腺相关病毒(rAAV-Her-2/neu)转染DC,并检测DC表型及Her-2的表达
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一、研究目的 本研究采用人外周血分离单核细胞,体外培养树突状细胞(dendritic cell,DC),Her-2/neu基因重组腺相关病毒(rAAV-Her-2/neu)转染DC,并检测DC表型及Her-2的表达、与DC混合培养前后的T淋巴细胞亚群、DC刺激同种混合淋巴细胞反应的能力及DC诱导的特异性CTL对乳腺癌细胞株的杀伤作用。为临床应用rAAV-Her-2/neu转导DC的主动免疫治疗乳腺癌提供实验依据。 二、材料和方法 (一) 材料 RPMI1640培养液、PBS缓冲液(PH7.4)、人AB血清、淋巴细胞分层液(Ficoll 1.077g/ml)、重组人GM-CSF、IL-4、TNF-α、Her-2/neu基因(跨膜区)重组腺相关病毒(rAAV-Her-2/neu)、丝裂霉素(MMC)、鼠抗人单抗FITC-CD1a、FITC-CD83、PE-CD40、PE-CD80、FITC-CD86、FITC-HLA-DR、PE-CD8、FITC-CD4、PE-CD3、PE-IgG1、FITC-IgG1、APC-Her-2、国产尼龙毛、放射性同位素~3H-TdR、96孔培养板、胎牛血清(FPS)、MTT、盐酸异丙醇、Her-2高表达的SK-BR-3人乳腺癌细胞株、Her-2表达阴性的MCF7人乳腺癌细胞株、超净工作台、二氧化碳电热恒温箱、SiGMa 1-13型离心机、LXY-Ⅱ型普通离心机、Nikon倒置显微镜及相机、FACS Calibur型流式细胞仪、Bio-Rad 550型酶标仪。
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