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本论文以液体发酵培养的蛹虫草[Cordycepsmilitaris(L.exFr.)Link]菌丝和人工培植蛹虫草子实体培养基残基为实验材料,以罗氏沼虾(Macrobrachiumrosenbergii)为实验对象,将罗氏沼虾分为1个对照组和6个实验组。在实验组的饵料中分别添加1%、2%、3%的蛹虫草菌丝和3%、6%、9%的蛹虫草子实体培养基残基,用含有添加组分的实验饵料饲喂罗氏沼虾21d后再改喂基础饵料7d。在实验的第0、7、14、21、28d取样,测定罗氏沼虾血清的酚氧化酶活力(PO)、溶菌活力(UL)和抗菌活力(UK),肌肉的超氧化物歧化酶活力(SOD),肝胰腺和肌肉的酸性磷酸酶活力(ACP)、碱性磷酸酶活力(ALP)、谷胱甘肽过氧化物酶活力(GSH-Px)和丙二醛(MDA)含量等免疫指标和抗氧化指标。另外,在实验的第14d和21d用浓度为7.2×106个/ml的病原菌嗜水气单胞菌(Aeromonashydrophila)对罗氏沼虾进行攻毒实验,记录发病死亡尾数,计算免疫保护率。
实验结果表明,分别添加蛹虫草菌丝和蛹虫草子实体培养基残基的饵料均可提高罗氏沼虾各实验指标的酶活力水平,且降低丙二醛的含量。其中,各浓度的蛹虫草子实体培养基残基的饵料均能显著提高绝大部分的酶(除肌肉的ACP外)的活力水平和显著降低MDA的含量。添加1%菌丝的饵料只能提高肌肉的SOD活力、肝胰腺及肌肉的GSH-Px、ALP活力,并降低肝胰腺和肌肉的MDA含量;2%的菌丝只能提高肌肉的SOD活力和GSH-Px活力及降低肝胰腺和肌肉的MDA含量;3%的菌丝只能提高肌肉的SOD、GSH-Px、ACP活力及降低肝胰腺和肌肉的MDA含量。
攻毒实验表明,实验组均能提高罗氏沼虾抗嗜水气单胞菌的能力。其中,2%的菌丝组和3%、6%的子实体培养基残基组效果明显,且第21d的抗菌效果要优于第14d的效果。
本实验表明:液体发酵培养的蛹虫草菌丝和人工培植子实体培养基的残基都能提高罗氏沼虾的免疫力,添加低、中剂量的实验组(1%、2%的菌丝组和3%、6%的子实体培养基残基组)对罗氏沼虾非特异性免疫功能和抗氧化能力都有较好的作用,添加蛹虫草子实体培养基残基实验组对罗氏沼虾的免疫力的提高比蛹虫草菌丝实验组好。在生产实践中,可考虑添加2%的蛹虫草菌丝或3%、6%的蛹虫草子实体培养基残基的饵料用于虾类养殖中。