基于移植性宫颈癌U27模型的异常黑胆质成熟颗粒体内抗肿瘤机制研究

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目的:本研究建立在移植性宫颈癌U27模型小鼠的基础上,探讨异常黑胆质成熟颗粒(ASMq)对移植性宫颈癌U27模型小鼠的体内抗肿瘤作用。  方法:建立移植性宫颈癌U27模型:168只小鼠,随机分为6组,即空白组,移植性宫颈癌U27模型组,环磷酰胺组,异常黑胆质成熟颗粒低、中、高剂量组(异常黑胆质成熟颗粒低、中、高剂量分别为2、4、8g·kg-1·d-1,连续给药10天)。分批测不同的指标:  (1)观察小鼠抑瘤率、胸腺、脾脏、肝脏及肾脏指数,小鼠血清中IL-2、IFN-γ、TNF-α含量的变化以及MTT法测定小鼠脾脏T淋巴细胞的增殖情况,用HE染色法检查小鼠肿瘤组织的形态学变化。  (2)采用核磁共振技术结合模式识别和正交偏最小二乘判别法进行分析,探讨不同剂量的异常黑胆质成熟颗粒给药治疗后各组小鼠血清中代谢产物的差异性以及代谢网络的变化。  (3)通过蛋白质免疫印迹法检测移植性宫颈癌U27模型小鼠的肿瘤组织中TGF-β1和TNF-α蛋白的表达水平。  结果:  (1)药物干预后,环磷酰胺组和异常黑胆质成熟颗粒低、中、高剂量组的抑瘤率分别为77.58%、30.53%、59.12%和50.73%,均具有明显的抑瘤作用(P<0.05)。与移植性宫颈癌U27模型组比较,异常黑胆质成熟颗粒不同剂量组小鼠的血清中IL-2、IFN-γ及TNF-α含量均显著增高(P<0.05);小鼠脾脏T淋巴细胞的增殖能力增强(P<0.05);在移植性宫颈癌U27模型组中肿瘤组织浸润性生长且扩散速度快,细胞大小不均,罗列紊乱,细胞有轻度水肿。在异常黑胆质成熟颗粒中、高剂量组的肿瘤组织中坏死处瘤细胞体积变小。  (2)采用代谢组学核磁共振技术研究各组小鼠的血清代谢组学发现,与空白组比较,移植性宫颈癌U27模型组小鼠血清中异亮氨酸、缬氨酸、丙氨酸、谷氨酰胺、甘氨酸等氨基酸及乳酸、柠檬酸、肌酸和1-甲基组氨酸等代谢物含量明显降低,而低密度脂蛋白(LDL)含量升高(P<0.05);与移植性宫颈癌U27模型组比较,给予不同剂量异常黑胆质成熟颗粒之后小鼠血清中异亮氨酸、亮氨酸、缬氨酸、丙氨酸、谷氨酰胺等氨基酸含量升高及糖蛋白、柠檬酸、肌酸等代谢物含量也有升高趋势(P<0.05)。  (3)与移植性宫颈癌U27模型组比较,环磷酰胺组和不同剂量的异常黑胆质成熟颗粒给药组小鼠肿瘤的TGF-β1蛋白表达水平均明显降低、TNF-α蛋白表达水平明显升高(P<0.05)。  结论:异常黑胆质成熟颗粒对移植性宫颈癌U27模型小鼠有一定的体内抗肿瘤作用,其作用机制可能不仅是提高机体免疫功能,调节移植性宫颈癌U27模型小鼠体内紊乱的氨基酸、能量代谢,也通过抑制相关蛋白TGF-β1的表达,促进TNF-α蛋白的表达,从而实现其治疗及预防肿瘤的作用。
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