三种胡枝子组织培养的研究

来源 :北京林业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:liongliong550
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胡枝子(Lespedeza)属于豆科植物,是一种多年生落叶灌木。胡枝子适应性、抗逆性强,是优良的水土保持树种,还具有很高的经济利用价值。目前胡枝子的研究现状大多集中在常规育种,对于其遗传改良工程研究还未见报道。本论文主要是研究二色胡枝子、短梗胡枝子和截叶胡枝子三种胡枝子的组织培养,从而为胡枝子遗传改良工作奠定基础。 试验以胡枝子种子作为外植体,分别采用升汞和次氯酸钠灭菌,不同种和种源之间的污染率和发芽率存在差异。两种不同种源的二色胡枝子子叶节段的最佳分化培养基有所不同,但6-BA浓度大约在0.2~0.5mg/L,生长素浓度差异较大,而各水平间的差异未达到显著水平;短梗胡枝子的6-BA浓度的最佳浓度在0.5mg/L~1.0mg/L,且与0.2mg/L达到显著差异,NAA和2,4-D的最佳浓度均为0.01mg/L,浓度间差异未达到显著水平;截叶胡枝子的6-BA最佳浓度在1.0~2.0mg/L之间,且与8.0mg/L的差异达到显著水平,NAA最佳浓度为0.01mg/L,与0.5mg/L差异显著,2,4-D为0,浓度间差异未达到显著水平。取子叶节分化的茎段做继代培养,去顶茎段与带顶茎段之间有所差异,平山地区的二色胡枝子去顶茎段继代培养最佳浓度为6-BA浓度为1.0mg/L,带顶茎段则为2.0mg/L,NAA浓度均为0.01mg/L;美国乔治亚二色胡枝子去顶茎段无需NAA,带顶茎段则为0.01mg/L,6-BA浓度均以1.0mg/L为宜;短梗胡枝子带顶茎段最佳6-BA浓度为1.0mg/L,2,4-D为0.05mg/L;截叶胡枝子去顶茎段最佳6-BA最佳浓度为2.0mg/L,带顶茎段则为5.0mg/L,生长素浓度间差异较大。将继代得到的茎段进行壮苗培养,美国二色胡枝子6-BA浓度为0.1mg/L,NAA或2,4-D为0.01mg/L;短梗胡枝子6-BA浓度为0.2mg/L,2,4-D浓度为0.02mg/L。胡枝子生根培养的激素以选用IBA为佳,二色胡枝子IBA最适浓度为0.1mg/L-1.5mg/L,短梗胡枝子为0.5mg/L,而截叶胡枝子为0.5~1.0mg/L。 胡枝子诱导愈伤产生相对容易,胚轴、胚根、子叶片、叶片等器官诱导愈伤,以胚轴诱导愈伤较容易,且愈伤量较多,在诱导愈伤的同时有些器官能同时诱导出根,但没有分化芽现象,将愈伤转入分化芽培养基中培养也未见分化,有待于进一步研究。 在三种胡枝子组织培养过程中,截叶胡枝子生长出现了较为严重的褐化和黄化现象。当MS大量元素减半,降低6-BA浓度,减少琼脂浓度均能显著降低褐化率,缩短生长周期也能减弱褐化,如添加褐化抑制剂,以添加活性炭最佳,当浓度为1.0g/L不仅有效降低褐化率,而且更有利于茎段苗的生长。当MS大量元素中MgSO4.7H2O为300mg/L,NH4NO3为1600mg/L,以及铁盐浓度为3倍时,能极显著的降低黄化率,而Ca2+的浓度、糖的种类和浓度以及光的种类,这些处理对黄化现象无显著作用。
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