产植酸酶菌株的筛选、诱变及产酶性质的初步研究

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植酸酶是催化植酸及植酸盐水解成肌醇和磷酸及磷酸盐的一类酶,将其添加到单胃动物植物性食品与饲料中,可以使植酸水解成肌醇和磷酸而被单胃动物所利用,而且释放被植酸络合的Ca2+、Mg2+、Zn2+等矿物元素和一些蛋白质,从而解除植酸的抗营养作用、提高食品与饲料的利用率、促进动物生长、减少了动物粪便中磷的残留量、降低环境的磷污染。  植酸酶在动物、植物和微生物中均有发现。微生物植酸酶由于种类丰富、表达量相对较大、容易提取而成为商品植酸酶的重要来源。虽然国内外已经有数种植酸酶商品问世,但还没有一种非常完美的产品。利用诱变手段改善植酸酶性质、提高植酸酶生产能力是当今植酸酶研究的主要方向。  本实验室从烟台大学校园内富含有机质的环境中采集土样,通过植酸钙平板透明圈法初筛和维生素C-硫酸-钼酸铵-酒石酸锑钾法测定植酸酶酶活复筛,共筛选到5株产植酸酶的霉菌,其中植酸酶活性最高的一株酶活为36.7U/ml。对这5株产植酸酶菌株进行紫外线诱变,得到3株酶活最高且产酶稳定的诱变株UV-117、UV-422和UV-509,酶活分别为47.2U/ml、43.3U/ml和55.0U/ml,将这3株诱变株进一步用亚硝基胍诱变,最终获得一株高产植酸酶突变株NTG-506,酶活达到112U/ml,比原始出发菌株的酶活提高了3.2倍。  突变株NTG-506进行了发酵产酶条件的优化和酶学性质的初步研究,NTG-506在250mL三角瓶中发酵培养,在装液量60ml,接种量2%时,培养第4d酶活达到最高,为124.5U/ml。植酸酶的最适反应温度35℃,经50℃处理10min后剩余酶活57%。
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