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淋巴瘤是我国常见的十大恶性肿瘤之一,每年新发淋巴瘤患者约8.4万人,死亡人数超过4.7万人,并以每年5%的速度上升,其中约九成患者罹患非霍奇金淋巴瘤(non-Hodgkin’s Lymphoma, NHL),其恶性程度更高、预后更差。目前常用的化疗药物虽治疗效果明显,但常伴有严重的不良反应。与普通化疗药相比,中药多成分多靶点,可以作用于肿瘤发病的不同环节,并且具有毒性低、不易产生耐药、提高机体免疫力、使患者生存质量更高等特点,近年来在抗肿瘤新药开发领域,具有抗肿瘤作用的中药及其有效成分得到了越来越多的关注。鱼腥草的抗肿瘤研究多集中在鱼腥草提取物上,目前研究的有白血病、肺癌、结肠癌、艾氏腹水癌、卵巢癌,对鱼腥草挥发油(Volatile oil from Houttuyniae Herba, HHO)的抗肿瘤作用研究较少。前期研究发现,HHO具有较好的抗NHL活性,国内外未见相关报道。因此,本文针对目前NHL日益高发的现状,选择高侵袭性的人Burkitt淋巴瘤Raji细胞为对象,对HHO进行了提取工艺、抗淋巴瘤谱效关系、诱导Raji细胞凋亡以及纳米结构脂质载体的制备研究,为HHO作为抗肿瘤新药的研制以及临床应用提供可靠的参考依据。1.HHO提取工艺优化通过单因素考察和正交试验,确定水蒸气蒸馏法提取HHO的最佳工艺条件为药材粉碎至粗粉,料液比1：10,浸泡10 h,加热回流10h。验证试验结果表明,最佳提取工艺提取率较高,可达0.11%,且重现性良好,具有实际应用价值,为工业大生产提供可信的参考数据。2.HHO抗淋巴瘤谱效关系研究采用偏最小二乘回归分析(PLS)技术,对13个产地挥发油GC-MS特征峰峰面积与挥发油对Raji细胞抑制率之间进行谱效关系研究。结果,特征峰X6, X14、X15、X22、X25、X26、X27对细胞抑制率的相关系数较大(≥0.1),占正相关系数总和的89.88%。表明HHO的抗淋巴瘤药效物质组即为与前面所述特征峰一一对应的物质,包括：对伞花烃、(-)-4-萜品醇、2,4,6-三甲基苯甲醇、甲基正壬酮、22号峰簇(十一醇、正癸酸、乙酸香叶酯)、2-十二烷酮和石竹烯,其对Raji细胞的抑制作用应为这些物质协同作用的结果。3.HHO诱导Raji细胞凋亡研究采用MTT法检测细胞增殖抑制率、Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡率以及PI单染法检测细胞周期的改变,来探讨HHO对Raji细胞的生长增殖及凋亡的影响。MTT试验结果表明,与对照组相比,鱼腥草挥发油能够显著抑制Raji细胞的生长增殖,24 h、48 h和72 h的半数抑制浓度分别为0.1258μL/mL、0.0996 μL/mL和0.1052且在一定浓度范围内具有明显的剂量依赖性,各组间差异具有统计学意义(P<0.05)；凋亡率检测结果显示,0.05μL/mL、0.10μL/mL 0.15μL/mL、0.2μL/mL的鱼腥草挥发油处理Raji细胞48 h后,细胞凋亡率分别为(13.10±0.82)%、(33.33±3.50)%、(55.53±0.90)%、(75.23±0.87)%,对照组为(3.27±0.74)%,各组间差异具有统计学意义(F=878.629,P<0.05)；周期检测结果显示,随着药物浓度的增加,G0/G1期细胞逐渐增加(F=645.930,P<0.05),提示Raji细胞被阻滞于G0/G1期。上述结果表明,鱼腥草挥发油能够显著诱导Raji细胞凋亡,将Raji细胞阻滞于G0/G1期,揭示其诱导Raji细胞凋亡的机制可能与阻滞细胞G1/M转化、阻碍细胞中DNA与蛋白质的合成有关。4.鱼腥草挥发油纳米结构脂质载体的制备采用熔融乳化-超声分散法制备鱼腥草挥发油纳米结构脂质载体(HHO-NLC),以纳米粒粒径及Zeta电位为评价指标,在单因素考察的基础上利用正交试验设计,优化制剂处方及制备工艺。采用GC法,建立NLC中HHO的定量方法,并从外观、形态、粒径分布、包封率、载药量及稳定性等方面对制剂进行评价。HHO-NLC的制剂处方：单硬脂酸甘油酯0.12 g,辛酸癸酸三甘油酯0.08 g,泊洛沙姆188 0.533 g,蛋黄卵磷脂0.267 g, HHO 0.1g,重蒸馏水加至20 mL；制备工艺：初乳搅拌20 min,超声分散10 min,振幅100%。HHO-NLC平均粒径约为(70.76±1.74) nm, Zeta电位为(-25.40±1.08)mv,透射电镜下可见纳米粒呈圆球状,轮廓规整,粒度分布均匀,包封率、载药量分别为90.33%和5.76%。稳定性试验结果表明,高温会导致HHO-NLC外观颜色的改变,而低温环境中纳米粒不稳定,提示制剂应放置在室温条件下密闭保存。