【摘 要】
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几丁质(又称甲壳素)的化学名称为(1,4)-2-乙酰氨基-β-D-葡聚糖,是地球上仅次于纤维素的天然多糖资源.几丁质酶能专一性水解几丁质,在生物防治以及充分利用几丁质资源上有着广泛
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几丁质(又称甲壳素)的化学名称为(1,4)-2-乙酰氨基-β-D-葡聚糖,是地球上仅次于纤维素的天然多糖资源.几丁质酶能专一性水解几丁质,在生物防治以及充分利用几丁质资源上有着广泛的应用前景.上海农科院顾真荣教授等从土壤中分离出一株具有高产几丁质酶性质的短芽孢杆菌(Bacillus brevis No.G1),该菌能分泌几丁质酶到其培养液中.该研究工作从Bacillus brevis No.G1的培养液出发,经过盐析,Phenyl-Sepharose疏水层析和DEAE Fast Flow阴离子交换层析等生化手段从该菌的发酵液中纯化到一种内切几丁质酶.该酶是由两个相同亚基组成的二聚体,分子量为85kDa.二聚体之间通过疏水相互作用结合,在55℃下用8M尿素处理可使酶解聚并丧失活性.其水解几丁质的最适温度为60℃.最适pH为8.0.该酶活性可被银离子抑制.酶学性质以及N端氨基到顺序(AVSNSKIIGY)表明我们纯化到的内切几丁质酶是一种尚未报道的新几丁质酶.与其他已发现的几丁质酶相比,该酶具有独特的二聚体结构;而且在广泛的温度范围内保持高度活性,在5M尿素存在的条件下不被胰蛋白酶水解.
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