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基质金属蛋白酶(matrixmentaloproteases，MMPs)是一类锌依赖性肽链内肽蛋白酶大家族，目前已经发现至少28个成员，MMPs涉及到正常组织的发育与再塑型、创伤修复、骨骼塑型、胚胎种植及肿瘤的侵袭和转移等生理病理过程。
MMP9(又称为明胶酶B)，是MMP家族中重要的一员，也是最早发现的MMPs之一。人MMP9基因定位在染色体20q11.2-q13.1，整个基因由13个外显子组成，编码蛋白质全长707氨基酸。MMP9是一个糖蛋白，分子量92KD，切除前肽区后形成82KD的酶活性形式。
MMP9的主要作用底物为明胶和Ⅳ/Ⅴ型胶原，正常情况下MMP9的表达水平受到严格的调控，在正常组织多为阴性表达，即使有成熟形式的MMP9也会被组织金属蛋白酶抑制剂1(TIMP1)所抑制。MMP9的主要生理功能是细胞外基质(extracellularmatrix，ECM)的重塑，主要涉及的生命过程有组织再生、个体的生长和发育与血管生成等。但在一些病理条件下常常诱导其高表达，如伤口的愈合和肿瘤的侵袭。MMP-9的表达也可由正常和恶性肿瘤细胞产生的多种细胞因子、生长因子和有丝分裂素所诱导。MMP9与多种肿瘤的发病有关，如肝癌，直肠癌，口腔鳞状细胞癌，鼻咽癌，胰腺癌等，在肺纤维化时也有所增加。研究报道MMP9可以作为肿瘤发生指示分子之一，有利于肿瘤的早期和术后复发的诊断。
MMP9也与肝细胞癌的术后复发和肝细胞癌的转移密切相关，出现高表达MMP9的肝细胞癌患者容易发生肝癌转移。为了研究MMP9在肝癌发生发展过程中的作用，建立相应的检测手段，我们提取肝癌病人癌组织的RNA进行逆转录，套式PCR扩增出MMP9比较保守和特异的FibronetinⅡ重复区的区域，经序列分析证实后，克隆至pQE30表达载体，构建了MMP9蛋白原核表达重组质粒。在大肠杆菌M15中经诱导后表达出17KD的带有His标签的融合蛋白，并通过Ni-NTAAgarose纯化出融合蛋白。以纯化的MMP9蛋白为免疫原，免疫家兔，制备出多克隆抗血清，ELISA检测显示所制备的抗体的效价为1：25600。进一步对抗血清进行了纯化，纯化的抗体不仅能与MMP9重组蛋白发生反应，而且能与肝癌细胞系HepG2细胞和子宫颈癌细胞系HeLa细胞中MMP9蛋白发生特异的反应。此外还可识别原发性肝细胞癌组织以及肝血管瘤组织的内源性MMP9蛋白。对3例肝细胞癌和3例肝血管瘤组织的定量检测发现，MMP9在肝血管瘤组织中的含量要高于原发性肝细胞癌。对包括猪和仓鼠正常肝组织的检测未发现有明显的MMP9表达。这些结果表明我们得到了具有良好的免疫反应性的MMP9抗体，为进一步研究MMP9在肿瘤发生发展中的作用提供了实验基础。