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随着人类社会的发展，人们对于健康生活的要求也越来越高。针对各种疾病的预防与治疗手段的开发与研究也日益受到重视。疫苗防治由病毒感染所致的疾病是相当有效的。当前采用动物细胞生产疫苗的技术开发正方兴未艾。MDCK细胞对病毒敏感，具有生产各种疫苗的潜力。本文针对哺乳动物细胞工业化生产狂犬疫苗的关键技术问题，研究并开发出一种适用于MDCK细胞生长及其狂犬病毒生产的无血清培养基。同时对MDCK细胞无血清培养制备狂犬病毒工艺进行了初步研究。主要包括如下的内容：
首先，通过析因实验设计和中心组合实验，并结合响应面优化的方法，研究并确定无血清培养基MDCK-SFM中的添加组分及其添加量。结果表明：混合脂、酵母抽提物、胰岛素、鱼胨水解物、大豆蛋白、转铁蛋白、碘甲腺氨酸钠和氢化可的松为关键的添加组分，其优化后的添加量分别为0.302g/L、0.535g/L、5mg/L、0.714g/L、0.598g/L、5mg/L、2.5pM和25nM。
然后，本研究考察MDCK细胞的无血清适应特性，MDCK细胞微载体培养细胞接种密度和葡萄糖初始添加浓度对MDCK细胞迅速扩增的影响。结果表明逐步适应优于直接适应，最终MDCK细胞在MDCK-SFM中以3.1×105 cells/ml接种，微载体浓度选择2g/L，初始葡萄糖添加浓度17.5mmol/L条件下可以获得最高细胞密度14.3×105cells/ml，与DMEM+10％NCS和VP-SFM相当，细胞密度分别为15.1×10s cells/ml和13.7×105 cells/ml。
通过试验考察了病毒的接种时间和接种量对MDCK细胞感染狂犬病毒产量的影响关系，病毒滴度会随着MOI和TOI先升高后降低，结果表明MOI=0.5，TOI=72h的条件下，可以得到最高病毒滴度。与商业培养基的感染结果相比MDCK-SFM可以适用于MDCK细胞的大规模培养，并且能够得到较高的病毒滴度，达到5.13(log10FFU/ml)左右。