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在活性导向下,以溶血空斑试验(PFC)免疫活性评价指标,对中医经典名方六味地黄汤的醇溶部位进行了免疫活性成分追踪分离。结果得到Fr1-3A和Fr1-4C18-A两个主要活性部位,并从中分离得到Fr1-3A(3)a、Fr1-3A(3)b、Fr1-3A(4)和Fr1-4C18-A(2)四个单体化合物. 活性评价结果表明:1.在各分离部位中,Fr1-3A和Fr1-4C18-A的活性较强,得率较高,为主要活性部位。2.单体化合物Fr1-4C18-A(2)对cy处理小鼠脾细胞抗体生成反应能力低下具有明显的改善作用;Fr1-3A(4)对SAMP8脾细胞增殖反应具有明显的改善作用;Fr1-3A(3)b体外在低浓度时对正常小鼠脾细胞自发和ConA诱导的增殖反应具有明显促进作用,随浓度增加则为抑制。提示这三个单体化合物可能为主要的免疫调节活性成分。 采用现代串联质谱技术,结合13C-NMR和1H-NMR,鉴定了Fr1-3A(3)a、Fr1-3A(3)b、Fr1-3A(4)和Fr1-4C18-A(2)的结构,分别为獐牙菜甙(sweroside)、莫诺甙(morroniside)、马钱素(loganin)和甘露三糖(manninotriose)。同时也一并鉴定了样品中所含的其它微量成分。 多糖构效关系的初步研究 从山茱萸中分离得到六个分子量均一的多糖,并对其中四个多糖(Cop-2c、Cop-3a、Cop-3b和Cop-3c)进行了结构研究,初步阐明了它们的结构特征。HPLC分析表明,它们的分子量分别为20000,24000,10000和17000 Da1。糖组成分析表明,除了少量的蛋白质外,它们均主要含半乳糖醛酸(Ga1A)以及鼠李糖(Rha)。甲基化分析表明,它们中的半