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慢性难愈合创面是指在各种内因或外因作用下不能通过正常愈合过程达到愈合,而进入一种病理炎性反应状态的创面。慢性创面的病因多种多样,发病机制复杂,当今尚无完全模拟真正符合人慢性创面特点的动物模型,而缺血创面可能最具代表性。用VAC技术治疗慢性创面已取得共识,但实用多大负压及何种负压工作方式能获得最佳效果,尚无一致意见,也缺乏实验依据。本实验拟进行探索。实验一:在兔双耳背皮肤距耳根3-3.5cm处分离结扎耳中央血管神经束和后边缘静脉,在耳背中部形成直径2.5cm全层皮肤缺血创面(保留软骨膜)。止血后置动物于特制木盒内。42只大耳白兔共84个创面,随机分为-50mmHg、-75mmHg和-100mmHg三组,分别施以间歇负压治疗(工作2分钟,停1分钟,每日4小时)和持续负压治疗(每日4小时),观察伤后1、3、7、10、14、20d创面愈合情况。取伤后7d组织标本进行Werstern blot检测、HE染色,观察VEGF(vascular endothelial growth factor)的表达及创面上皮再生和肉芽组织生长情况,以及各时间点细胞凋亡的检测。结果:各间歇负压组治疗效果优于相应时间点持续负压组,其中-50mmHg治疗组创面愈合最快,-75mmHg组其次,-100mmHg组最慢。-50mmHg组与-75mmHg,-100mmHg和对照组比较,能更快的促进创面VEGF表达、肉芽组织形成,而细胞凋亡最少。实验二:除创面用有机玻璃罩联合纱布或海绵覆盖外,实验方法包括实验材料、创面制作、指标、负压治疗分组完全和实验一相同。有机玻璃罩直径2.5cm,高2.5cm,顶部有孔用于与负压引流装置连接。结果:(1)伤后7天起,两组创面愈合率也明显增加,-50mmHg和-75mmHg间歇及连续治疗组均优于-100mmHg治疗组,也以-50mmHg组最好,而-100mmHg负压治疗伤后第3天起,陆续发生创面出血、坏死。(2)伤后第3天和7天,无论纱布组和海绵组,也不论用间歇负压还是连续负压治疗,均出现双凋亡高峰,以第7天者峰值最高,凋亡指数均高于实验组。