【摘 要】
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细胞的分裂和增殖依赖于细胞周期的精确调控。Cx43蛋白是一种可通过控制细胞周期来抑制肿瘤的蛋白。AKAP95蛋白与细胞周期密切相关，可与细胞周期蛋白相互结合。AKAP95蛋白是PK
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细胞的分裂和增殖依赖于细胞周期的精确调控。Cx43蛋白是一种可通过控制细胞周期来抑制肿瘤的蛋白。AKAP95蛋白与细胞周期密切相关，可与细胞周期蛋白相互结合。AKAP95蛋白是PKA的锚定蛋白，PKA可磷酸化Cx43蛋白的丝氨酸位点。
为了研究细胞周期不同时相下AKAP95蛋白与Cx43蛋白的相互作用关系，选用了L-O2细胞和A549细胞。为实现细胞的同步化，选用了含羞草碱、阿菲迪霉素、噻氨酯哒唑和秋水仙碱四种细胞周期阻断试剂，分别将细胞阻断于G1、S、G2和M期，同时用流式细胞术和细胞免疫荧光法测定四种试剂的阻断效率。在A549细胞中，采用细胞免疫荧光方法观察细胞不同时相下AKAP95蛋白与Cx43蛋白的定位和共定位，用免疫印迹和免疫共沉淀实验来研究两种蛋白在细胞周期各个时相下的表达量及相互作用关系。在L-O2细胞中，用免疫印迹和免疫共沉淀实验来研究两种蛋白在细胞周期各个时相下的定位、表达量及相互作用关系。通过实验发现，Cx43蛋白和AKAP95蛋白在两种细胞中均存在相互作用关系，且相互作用主要存在于分裂期。两种蛋白的定位和表达量随着细胞周期的进行而发生变化，且在两种细胞内的变化不相同。
为了研究PKA的活性对Cx43蛋白和AKAP95蛋白相互作用的影响，选用了PKA抑制剂H-89和PKA激活剂Foskolin分别处理A549细胞，细胞免疫荧光实验进行检测。经过实验发现PKA活性不改变A549细胞中AKAP95蛋白与Cx43蛋白的定位情况，但PKA活性可影响有丝分裂过程中这两种蛋白的结合作用。
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