【摘 要】
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目的：观察缺血预适应对在体大鼠急性心肌缺血再灌注损伤的保护作用及与自噬蛋白Beclin1与抗凋亡蛋白Bcl-2的可能关联,从而为缺血性心脏病的治疗提供新思路。 方法：雄性Sprag
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目的：观察缺血预适应对在体大鼠急性心肌缺血再灌注损伤的保护作用及与自噬蛋白Beclin1与抗凋亡蛋白Bcl-2的可能关联,从而为缺血性心脏病的治疗提供新思路。 方法：雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠24只,重量200g-250g,随机平均分为假手术(Sham)组、缺血/再灌注(Ischemia-reperfusion,I/R)组、缺血预适应(IschemicPreconditioning,IPC)组。IPC组在缺血再灌注前给予短暂缺血5分钟、再灌注5分钟并循环3次,随后结扎30分钟,再灌120分钟。应用电子显微镜观察心肌细胞自噬泡的发生,线粒体的形态学改变;Western blotting测定LC3-II和Beclin1蛋白的表达;免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation,Co-IP)检测Beclin1和Bcl-2蛋白的结合情况;TUNEL法检测细胞凋亡。 结果：与I/R组相比,IPC组自噬泡数量增多,线粒体超微结构损伤减轻。LC3-II作为评价自噬强度的指标,IPC与I/R组相比,该值上调(P<0.05)。I/R组与S组、IPC组相比,Beclin 1与Bcl-2蛋白结合程度明显降低(P<0.01);而这两组之间差异无显著性(P>0.05)。IPC组细胞凋亡率较I/R组明显降低(P<0.01)。 结论：急性缺血再灌注可诱导心肌细胞自噬的发生,缺血预适应可通过促进Beclin1与Bcl-2的结合以减少再灌注阶段起损伤心肌作用的Beclin 1依赖性过度自噬而减轻细胞损伤;并协同抗凋亡途径发挥心肌保护作用。
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