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目的:探究黄芪甲苷对Na2S204诱导的PC12细胞(大鼠嗜铬细胞瘤细胞,pheochromocytoma cell)OGD/R损伤的保护作用及其相关的保护作用机制。方法:采用含有不同浓度的Na2S204(10、8、6、4、2mmol/L)的Earles溶液对PC12细胞进行缺氧缺糖损伤,并用CCK-8实验方法筛选出最佳损伤浓度;应用尼莫地平为阳性药,并在Na2S204的最佳损伤浓度条件下,加入不同浓度的尼莫地平(25、5、1μmol/L)进行预保护,采用CCK-8方法筛选出阳性药最佳浓度;应用CCK-8实验测定黄芪甲苷对PC12细胞的增殖影响;应用显微镜观察黄芪甲苷预保护后各组细胞形态学差异;采用CCK-8方法测定不同浓度黄芪甲苷预保护后各组细胞的存活率;LDH试剂盒法测定各组细胞的LDH漏出量;Hoechst33342/PI染色法检测各组细胞凋亡与坏死情况;加入罗丹明123通过荧光分光光度计法测定各组的膜电位;试剂盒法测定不同浓度黄芪甲苷预保护后各组细胞SOD、MDA、GSH、ROS的含量;采用western blot测定加入PI3K/Akt通道抑制剂LY294002前后各组细胞Akt、p-Akt、Bax、Bcl-2和Caspase-3的蛋白表达量,并用CCK-8实验测定加入抑制剂LY294002后各组细胞的存活率。结果:通过CCK-8实验显示,Na2S204浓度为10mmol/L时,对PC12细胞缺血/再灌注损伤的细胞存活率在50%左右,与空白组相比具有极显著性差异(P<0.01),在此种损伤条件下,尼莫地平浓度为5μmol/L时保护作用最强;CCK-8实验结果显示,黄芪甲苷预保护后能够提高OGD/R损伤时细胞的存活率,且具有一定的浓度梯度差异;Hoechst33342/PI染色实验中结果显示,随着黄芪甲苷浓度的升高荧光强度逐渐降低;LDH试剂盒实验显示,黄芪甲苷预保护后加药组LDH的含量随药物浓度的升高而降低;在线粒体膜电位的测定实验中,黄芪甲苷能够升高OGD/R损伤时细胞的膜电位;抗氧化试剂盒结果显示,黄芪甲苷预保护后能够提高OGD/R损伤时细胞SOD、GSH的含量,降低MDA、ROS的含量;通过western blot实验结果显示,在加入PI3K/Akt抑制剂LY294002前,加药组p-Akt/Akt、Bcl-2蛋白表达量均随药物浓度升高而升高,Bax、Caspase-3蛋白表达量随药物浓度升高而降低;加入抑制剂后,加药组p-Akt/Akt、Bcl-2蛋白表达量均降低,Bax与Caspase-3蛋白表达量相对提高。结论:黄芪甲苷在PC12细胞OGD/R损伤时能够提高细胞的存活率以及线粒体膜电位,降低LDH的漏出量,能够通过增加SOD、GSH含量并降低MDA、ROS的含量从而减弱细胞氧化应激损伤的能力,并能够通过增加p-Akt/Akt的蛋白含量,进而增加Bcl-2的蛋白表达,降低Bax、Caspase-3的蛋白表达,因此,黄芪甲苷对PC12细胞OGD/R损伤具有保护作用,并且其保护作用机制与抑制氧化应激损伤以及PI3K/Akt/Bcl-2信号通路密切相关。