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老年性痴呆(SD)，亦称阿尔茨海默病(AD)是一种以进行性认知障碍和记忆能力损害为主的中枢神经系统(CNS)退行性疾病，并伴有不同程度的运动、认知、语言和人格等多方面的异常。AD的发病率随着人口年龄的增大而增高。由于该病病程长，致残率高，又缺乏有效的治疗方法，给家庭和社会带来沉重的经济和精神负担。因此，寻找有效的AD治疗手段已成为当今医学界迫切的研究课题。
AD的主要病理改变是皮质、海马等部位出现大量老年斑(SP)、神经元纤维缠结(NFT)，同时大量神经元溃变坏死，其中以基底前脑胆碱能神经元丢失最为严重。
AD研究进展缓慢的一个重要原因是目前尚没有一个能全面再现、模拟老年性痴呆病理特征和行为学症状的模型。基底前脑胆碱能神经元退变是该病的显著病理特征之一，对患者的行为认知缺陷起非常重要的作用。本课题采用选择性免疫毒素192-IgG-saporin侧脑室注射来建立AD动物模型，从而模拟AD基底前脑胆碱能神经元退变的病理改变和行为学症状，分析这些神经元的功能，寻找新的AD治疗手段。
目前，AD的一些治疗方法只能缓解AD患者的部分症状，有些药物甚至会产生严重的副作用。神经干细胞(NSCs)在发育和成年哺乳动物CNS的存在并体外培养成功，尤其是神经干细胞系的建立，解决了脑细胞供体不足的难题，成为脑细胞移植的理想供体。NSCs的特性是：在体外自我复制，稳定增殖；在宿主脑内可根据脑内微环境分化为特异性神经细胞，并与宿主脑组织整合较好。
本实验研究内容主要包括：
1．新生鼠海马NSCs的分离、培养与鉴定。
2．侧脑室注射免疫毒素192-IgG-saporin建立老年性痴呆(AD)动物模型。
3．NSCs移植治疗192-IgG-saporin致AD动物模型的疗效观察与评价。
材料和方法:
1.神经干细胞(NSCs)的分离、纯化与鉴定取新生SD大鼠(<24 h)的海马，机械分离，加入胰蛋白酶和DNA酶消化分散，制成单细胞悬液，加入含2％B<,27>、表皮生长因子(EGF)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)(终浓度均为10ng/ml)的DMEM/F12无血清培养基的培养瓶中，放置在37℃、5％CO<,2>培养箱内培养。将原代培养约5-7d形成的细胞球离心，按上述条件半量换液，吹打成单细胞悬液；以后每5-7d传代一次，方法同前。用免疫细胞化学法，行抗Nestin染色，鉴定培养细胞的胚胎源性。
2.老年性痴呆(AD)动物模型的制备健康成年雄性SD大鼠38只，体重250～300g，(由广州医学院实验动物中心提供)随机分为4组，正常(正常组)8只，单侧生理盐水注射组(损伤对照组-对照组)8只，单侧(左侧)侧脑室注射192-IgG-saporin致AD模型组(模型组)10只，基底前脑神经干细胞(NSCs)移植组(治疗组)12只。
3.基底前脑NSCs移植21天后，γ-迷宫检测各组大鼠的学习和记忆能力；检测后，治疗组大鼠行同侧基底前脑NSCs移植，用10μl微量进样器取5μl(1×10<4>个/μl)NSCs，按坐标为：前囟前0.6mm、正中线左侧旁开0.6mm，进针深5.5mm。移植后1个月γ-迷宫检测治疗组大鼠的学习和记忆能力。
4.组织切片及染色动物经左心室-升主动脉灌注、固定、取脑、后固定、蔗糖渗透，冰冻切片。基底前脑切片行抗-ChAT免疫组织化学染色和NADPH-d组织化学染色，对内侧隔核(MS)和斜角带垂直支(VDB)的ChAT阳性神经元和NOS阳性神经元进行计数和形态学参数的测定。用SPSS11.0统计软件包进行统计学处理。
结论:
1.侧脑室注射免疫毒素192-IgG-saporin，导致基底前脑MS、VDB区内ChAT和NOS阳性神经元大量丢失；大鼠的学习和记忆能力明显下降。结果表明应用免疫毒素192-IgG-saporin可成功建立AD动物模型。
2.NSCs移植对免疫毒素192-IgG-saporin致AD模型鼠基底前脑MS、VDB的ChAT和NOS阳性神经元有明显的补充和保护作用。
3.NSCs移植能够改善免疫毒素192-IgG-saporin致AD模型鼠的空间学习、记忆能力。