低渗溶液通过Ca/CaMKⅡ和PKC影响大鼠心室肌细胞瞬时和持续性钠电流

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目的:诸多研究文献表明低渗溶液可以引起细胞膜离子通道活动的改变,但迄今为止尚未见细胞外低渗对心室肌细胞钠电流影响的报道,本实验拟就低渗溶液对大鼠心室肌细胞瞬时钠电流(INaT)和持续性钠电流(INaP)的影响探讨,同时我们也就细胞内信号转导系统是否参与了低渗溶液对大鼠心室肌细胞瞬时钠电流(INaT)和持续性钠电流(INaP)的调制过程进行了初步研究。 方法:运用膜片钳技术(全细胞记录)以及标准玻璃微电极技术同时记录大鼠心室肌细胞瞬时钠电流(INaT)和持续性钠电流(INaP); 结果:低渗(280 mOsm/kg)使瞬时钠电流的幅度从-249.2±14.8 pA/pF减小至-162.2±15.9 pA/pF,抑制率为34.92±1.8%(n=10,p<0.05),瞬时钠电流失活曲线V1/2从-78.7±2.2 mV移至-84.3±2.5 mV(n=10,p<0.05),复活曲线τ值从4.40±0.25 ms延长到8.02±0.23 ms(n=10,p<0.05),慢失活效应曲线下移,低渗灌流液减小瞬时钠电流的同时使持续性钠电流从-0.22±0.07 pA/pF增加到-0.53±0.07 pA/pF(n=10,p<0.05),胞瞬时钠电流(INaT)和持续性钠电流(INaP)出现互变现象,即胞瞬时钠电流减小的同时持续性钠电流增大或者瞬时钠电流增大持续性钠电流减小,用等渗溶液(300 mOsm/kg)复灌后上述参数可发生可逆性回复。PKC通路阻断剂BIM(5 ummol/L和Ca/CaMKⅡ通路阻断剂KN-93(10 ummol/L)以及Ca2+螯合剂BAPTA(1 mmol/L)能够抑制上述低渗灌流液对瞬时钠电流(INaT)和持续性钠电流(INaP)的影响: 结论:低渗刺激可以抑制大鼠心室肌瞬时钠电流(INaT)增强其持续性钠电流(INaP)和慢失活钠电流,这些影响是可逆性的,胞内信号转导系统中PKC通路和Ca/CaM通路及Ca2+参与了低渗对钠电流的调制作用。
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