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肺癌是当今世界上发病率和致死率最高的恶性肿瘤之一，在我国已取代肝痛成为我国首位恶性肿瘤死亡原因。因此，筛选、鉴定和肺癌相关的基因以及蛋白，将有助于我们更深入的了解肺癌的分子机理。S100A7又称作psoriasin，是S100蛋白家族成员之一。S100家族蛋白与肿瘤的发生和发展密切相关，它的表达具有明显的细胞和组织特异性。通过与不同的靶蛋白相互作用参与细胞周期进程、细胞分化、癌症发生、发展及转移。目前，有文献报导在乳腺癌巾S100A7通过和Jabl蛋白相互作用发挥其促进癌细胞生长的功能。
我们前期工作发现，S100A7选择性表达于大细胞肺痛和肺鳞痛组织中，而在小细胞肺癌、肺腺癌和正常肺组织中不表达。并发现S100A7的高表达与肺鳞癌的脑转移密切相关。对于S100A7的生物学功能研究发现，S100A7表达下调对H226Br细胞体外生长有一定的抑制作用，并初步证实S100A7表达下调后可引起p27表达升高。因此筛选和鉴定S100A7相互作用蛋白对阐明其在肺癌中的生物学作用至关重要。本研究将通过串联亲和纯化并质谱等技术等对S100A7的相互作用蛋白进行筛选、鉴定以及相关的验证。
我们首先构建了pcDNA-TAP-tagged-S100A7真核表达质粒，将其转入细胞中，经G418筛选后获得稳定表达目的蛋白的克隆细胞株，利用串联亲和纯化技术筛选S100A7相互作用蛋白或蛋白复合体，经SDS-PAGE、考马斯亮蓝染色后将肉眼可见的条带通过质谱技术鉴定我们获得了14个候选蛋白，我们从中选择了S100All、PDCD-6、CASPASE-14作为候选蛋白通过免疫共沉淀技术来验证其是否与S100A7在肺癌细胞H226Br中存在相互作用，结果显示上述3个候选蛋白与S100A7无直接的相互作用。因此我们推测它们与S100A7之间可能存在间接的相互作用，接下来我们在沉默和过表达S100A7的细胞株中检测了包含上述3个基因的表达水平变化，发现在沉默S100A7的肺癌细胞H226Br中S100All、PDCD-6、CASPASE-14基因表达水平有显著的降低；而在过表达S100A7的肺癌细胞NCI-H226中基因表达水平的变化则相反。上述实验结果的原因，我们考虑TAP技术是一种寻找蛋白复合体的技术，S100A11、PDCD-6、CASPASE-14与S100A7之间可能存在着间接的相互作用，它们之间有其它蛋白起着桥梁和连接的作用。其它候选蛋白的验证工作我们正在进行。
综上所述，本论文的实验结果表明通过串联亲和纯化技术我们找到了一些与S100A7直接或间接作用的蛋白，但相互作用机制还有待于进一步研究。