【摘 要】
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急性早幼粒细胞性白血病(APL)是急性髓性白血病(AML)M3型,常因染色体易位引起RARα与其它基因(如PML)形成融合基因,干扰维甲酸信号传导通路,使细胞分化停滞;药理浓度的全反式
【出 处】
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上海第二医科大学 上海交通大学医学院 上海交通大学
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急性早幼粒细胞性白血病(APL)是急性髓性白血病(AML)M3型,常因染色体易位引起RARα与其它基因(如PML)形成融合基因,干扰维甲酸信号传导通路,使细胞分化停滞;药理浓度的全反式维甲酸能够解除PML-RARα对相关靶基因的转录抑制,促进APL细胞的分化.虽然人们对ATRA诱导分化进行了很多研究,但对其中所涉及的复杂调控网络仍不清楚.为在蛋白质组水平对维甲酸诱导分化的调控网络进行深入研究,该文建立了稳定可靠的二维电泳和质谱技术平台.对相同样品二维电泳的重复性可达93.3％;利用MALDI-TOF-TOF质谱仪对银染胶的蛋白点鉴定的成功率约为58％.对于二维电泳得到的大量原始数据,该文采用白组织图(SOM)及柱状图展示和CPP来进行分析,使蛋白谱变化的规律更加直观,从而发现在ATRA调节通路中起重要作用的蛋白质.基因芯片技术是功能基因组学的重要研究工具,为转录组水平研究生物医学问题提供了手段,利用蛋白质组和基因芯片技术可以从蛋白质水平和mRNA水平对人类疾病的发病机制等生物医学问题进行更全面的研究.因此,我们应用二维电泳技术、生物质谱技术和cDNA芯片技术,结合自组织图(SOM)与成分平面展示等生物信息学手段,分析了药理浓度的ATRA诱导NB4细胞分化不同时相(0h、12h、和48h)蛋白和基因表达谱的变化,对ATRA诱导分化的动态调控网络进行了较为深入地研究.通过对调变的蛋白功能的分析可以看出ATRA诱导的分化是一个复杂有序的过程,表现为细胞退出细胞周期,凋亡和增殖受到抑制、核酸的合成代谢被强烈抑制、泛素-蛋白酶体系统激活;随着细胞的分化,细胞的杀菌、吞噬和黏附功能逐渐增强,开始具有正常中性粒细胞的功能.我们的结果表明在ATRA诱导下NB4细胞退出细胞周期,增殖受到抑制.
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