论文部分内容阅读
肺癌是一种对人类健康和生命威胁很大的恶性肿瘤，近年来其发病率及死亡率增加较快，已成为恶性肿瘤中发病及死亡率的第一位。如何解决其诊断及治疗方面的问题已成为当务之急。近年为随着基础医学相关方面的发展，运用免疫学及分子生物学方面的新技术在该领域已取得了很大的进步。VEGF,CD34，P16的发现及在肿瘤研究方面的运用，正是这类的体现。大量的研究实验证明，肺癌的发生，发展和转移的过程受各种基因的调控，肿瘤血管形成是肿瘤生长和转移的物质和形态学基础。目前认为实体瘤的形成与生长过程经历两个阶段，即血管前期及血管期。在血管前期，由于肿瘤的血管生成能力缺失或不足，肿瘤仅有几个立方毫米，由一个或少数几个癌变细胞分裂增殖形成一簇无血管的细胞团。靠单纯弥散完成与周围组织的营养和代谢产物的交换。随着肿瘤的增大，单纯扩散已不能保障细胞团簇的呼吸和新陈代谢需要，此时肿瘤体积增大缓慢，但不意味着肿瘤细胞增殖缓慢。在血管期，由于新生血管的形成，使肿瘤组织进入迅速生长阶段，侵袭和转移能力都增强，并在临床上表现出一系列症状和体征。而肿瘤血管的生成由血管内皮细胞分泌生长因子来完成的。这些因子如VEGF（血管内皮生长因子），BFGF（碱性成纤维细胞生长因子），TGF（转化生长因子）等可以促进肿瘤生长，其中VEGF是刺激肿瘤生长的主要因子，它与肿瘤的生长、浸润及转移密切相关。 <WP=26>VEGF是1989年由Ferrara等人首先从牛垂体滤液星状细胞体外培养液中纯化出来，并发现具有促血管内皮细胞有丝分裂的活性VEGF不仅刺激内皮细胞的有丝分裂和血管形成，同时它还具有促血管通透作用。导致血管大分子物质的渗出从而有利于血管外基质的形成，人们发现VEGF与微血管密度（MVD）呈正相关，说明VEGF参与了血管形成过程。血管内皮细胞的标志物有很多如抗FⅧRA，CD31，CD34等，近年来报道CD34抗体对肿瘤内毛细血管、小血管内皮细胞（EC）稳定性及敏感性较强，有较强的可重复性（本研究正是基于此点运用抗CD34）。P16基因位于9号染色体的P21区域,是1993年由Serrano等发现并被克隆成功,它编码的P16蛋白是迄今为止人类发现的第一个最直接的抑制肿瘤发生的细胞固有成份,它与许多肿瘤的发生发展密切相关,是细胞周期的调节和抑制者。P16基因蛋白又称多种肿瘤抑制基因蛋白(Mutiple Tumor Suppressor1,简写MTS1)或CDKN2基因，是1994年ID美国犹他医学中心的Kamb等人首次报道的。细胞周期失控是肿瘤发生的重要原因。这个过程通过细胞增殖周期实现的。癌基因和抑癌基因对细胞周期各环节直接或间接的调控作用发生异常而导致肿瘤的发生。大量文献已证实P16基因在正常细胞周期中起负反馈作用。目前，关于VEGF,CD34，P16在肿瘤方面的作用已有很多文献相继报道，但在肺癌的研究方面同时行VEGF,CD34，P16对肺癌组织的表达并探讨其临床意义，国内外相关文献较少，本试验正是想在此方面进行研究。收集吉林大学一二三院胸外科2001-2003年间手术切除的新鲜肺癌标本82例（术前均未行抗癌治疗），采用S-P法进行免疫组化，分别用微血管定量方法，VEGF计量方法，P16计量方法对结果进行判断，分别用t检验，X2检验，方差分析对数据进行统计学处理，得到如下结果 <WP=27>（1）织中MVD值（平均血管密度）与淋巴转移临床分期密切相关（P〈0.05〉而与患者性别、年龄、肿瘤大小、组织类型、分化程度无关（P）0.05）。（2）VEGF主要表达于肿瘤细胞胞浆或胞膜与肺癌淋巴结转移临床分期有关（P〈0.05〉。（3）P16主要表达于肿瘤细胞胞核，其表达与肺癌淋巴结转移，临床分期有关（P〈0.05〉。（4）肺癌VEGF表达与MVD值密切相关（P〈0.05〉，肺癌P16与VRGF表达呈负相关（P〈0.05〉。通过以上结果可以得出如下结论，VEGF促进肿瘤血管生成，VEGF表达上调或P16表达下调对肺癌发生、发展及转移起重要作用，为判定肿瘤生物行为和转移潜能提供了重要指标。根据有关文献报道，突变型P53蛋白基因可通过上调血管内皮生长因子（VEGF）表达而促进肿瘤血管形成。我们预感P16基因亦有可能会对VEGF有调节作用，这方面的研究需进一步。综上所述，VEGF和抑癌基因P16在肺癌的发生、发展中起了重要作用，这无疑为肺癌的临床检测病情进程，基因的诊治带来了广阔的前景，同时随着肿瘤血管生成机制研究的深入及基因治疗将会日益受到重视，并有可能成为21世纪肺癌治疗的重要手段。同时人们渴望最终将P16基因用于临床，首先检测P16的改变，进行肺癌的辅助诊断，其改变与临床分期相结合判断其病程，并将P16基因做为肺癌基因防治的靶基因。随VEGF及P16基因的深入研究，必将为肺癌的发病机制及诊治提供新的思路。