论文部分内容阅读
目的:1.探讨胰岛素抵抗状态下锌α2糖蛋白(Zinc-alpha2-glycoprotein,ZAG)对于在胰岛素信号通路中起关键作用的信号蛋白p-Akt Ser473及GLUT4的影响;2.探讨胰岛素抵抗状态下ZAG对于在自噬通路中起关键作用的蛋白m TOR、Atg7及LC3-Ⅱ的影响;3.探讨ZAG对胰岛素信号通路的影响是否与自噬活性相关。方法:诱导3T3-L1前脂肪细胞分化为成熟脂肪细胞,将成熟脂肪细胞分为对照组,胰岛素抵抗组,ZAG组,ZAG+氯喹组及氯喹组,对照组继续用DMEM培养基培养,另外4组加入含1umol/L地塞米松的培养液培养2天,建立胰岛素抵抗模型,ZAG组再添加浓度为25ug/mL的ZAG作用24h,氯喹组再添加浓度为50umol/L的氯喹作用24h,ZAG+氯喹组同时添加浓度为25ug/mL的ZAG和浓度为50umol/L的氯喹作用24h。提取各组脂肪细胞mRNA及蛋白,用RT-PCR检测各组GLUT4、mTOR、Atg7、LC3-Ⅱ的mRNA的表达,用Western-blotting的方法检测各组p-Akt Ser473、GLUT4、mTOR、Atg7、LC3-Ⅱ蛋白的表达,并进行统计,得出相关性。结果:1.对照组测定的p-AktSer473、GLUT4、Atg7、LC3-Ⅱ表达较胰岛素抵抗组显著增高(P<0.05),其m TOR表达较胰岛素抵抗组显著减少(P<0.05)。2.ZAG组测定的p-AktSer473、GLUT4、Atg7、LC3-Ⅱ表达较胰岛素抵抗组显著增高(P<0.05),其m TOR表达较胰岛素抵抗组显著减少(P<0.05)。3.氯喹组测定的p-AktSer473、GLUT4、Atg7、LC3-Ⅱ表达较胰岛素抵抗组显著减少(P<0.05),其m TOR表达较胰岛素抵抗组显著增高(P<0.05)。4.ZAG+氯喹组测定的p-AktSer473、GLUT4、Atg7、LC3-Ⅱ表达较ZAG组显著减少(P<0.05),其m TOR表达较ZAG组显著增高(P<0.05)。结论:1.ZAG可以增强脂肪细胞胰岛素信号传导,改善胰岛素抵抗;2.抑制自噬活性会加重脂肪细胞的胰岛素抵抗;3.抑制脂肪细胞自噬活性后,ZAG增强胰岛素信号传导,改善胰岛素抵抗的作用会减弱;4.ZAG通过多种机制改善脂肪细胞胰岛素抵抗,其中通过增加自噬活性减轻胰岛素抵抗可能是其减轻胰岛素抵抗的机制之一。