DAPI标记骨髓单个核细胞移植治疗脑缺血模型小鼠的实验研究

来源 :哈尔滨医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:itour123
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目的:观察缺血性脑卒中小鼠经尾静脉移植异体骨髓单个核细胞(bonemarrow mononuclear cells,BMMCs)后,骨髓单个核细胞(BMMCs)在脑缺血小鼠脑组织中的存活、迁移、分布、增值、分化及对小鼠缺血性脑损伤的治疗作用。  方法:成年雄性Balb/c小鼠30只,随机分为骨髓单个核细胞(BMMCs)治疗组和磷酸盐缓冲液(PBS)对照组各15只,采用开颅机械闭塞法(大脑中动脉电凝)制作脑缺血模型。各组分别在造模成功后第24小时经尾静脉移植2×106/ml DAPI标记的BMMCs悬液或等体积的PBS液;并且各组在造模成功后24小时(移植前)及移植后每天采用双盲法分别进行mNSS评分,评估小鼠神经功能恢复情况,采用SPSS16.0软件对统计结果进行分析。术后第15天,每组随机抽取5只,取脑组织行免疫荧光共聚焦检测增殖细胞核抗原(proliferatingcell nuclear antigen,PCNA)和早期神经元特异性抗原双皮质素(doublecoxtin,DCX)的表达情况。  结果:15天后,治疗组小鼠的神经功能评分均明显低于对照组(p<0.05),并且神经功能评分随着治疗时间的延长逐渐降低;免疫荧光共聚焦检测证实:治疗组移植的BMMCs向脑缺血区迁移,并集中于缺血区周围脑组织,而缺血对侧正常脑组织无移植的BMMCs;同时也观察到移植的BMMCs在缺血周围脑组织表达增殖细胞核抗原及早期神经元特异性抗原双皮质素,而在缺血对侧脑组织或对照组中未检测到这两种标记物。  结论:经尾静脉移植的异体BMMCs能够在脑缺血小鼠的脑组织内存活、并向缺血区周围脑组织迁移、增值分化为“神经元样细胞”,促进脑缺血小鼠的神经功能恢复,有利于缺血性脑损伤的修复。
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