荧光原位杂交技术检测多发性骨髓瘤细胞遗传学异常及其意义

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目的应用荧光原位杂交技术(FISH,flurorescence in situ hybridization )检测多发性骨髓瘤(MM,multiple myeloma)常见的细胞遗传学异常并分析其临床意义。方法结合1q21/RB1、D13S319/P53、IGH一组DNA特异性探针和荧光原位杂交技术(FISH,flurorescence in situ hybridization )检测33例MM患者的染色体异常,同时和常规细胞遗传学检测方法(R显带)进行比较,并分析常见染色体异常的临床意义。结果(1)R显带共检出8例核型异常,总体检出率为26.4%。荧光原位杂交技术共检出69.6(%23/33)的患者有遗传学异常,其中1q21扩增总体检出率为48.4%,RB-1缺失率为18.1%,D13S319缺失率为33.3%,IgH重排检出率为27.2%,P53缺失率为15.1%。(2)R显带方法和FISH技术两种方法del(13q14)检出率分别为6%和33.3%,IgH重排检出率分别为6%和27.2%,1q21扩增检出率分别为3%和48.4%。比较两组检出率后发现FISH可明显提高染色体异常的检出率,两组异常率经χ2检验差异有统计学意义(P= 0.00、P= 0.02和P= 0.00)。(3)FISH检测发现RB-1和D13S319两个位点缺失密切相关(P=0.00),检测6例患者RB-1基因缺失均同时伴有D13S319位点缺失;RB-1、D13S319两个位点缺失与P53基因缺失密切相关(P=0.00),5例P53基因缺失中3例同时伴有RB-1、D13S319两个位点缺失;2例伴有D13S319基因缺失。1q21与RB-1、D13S319、P53基因缺失、IgH基因重排之间无明显相关性(P>0.05)。(4)16例1q21扩增患者中,11例Ⅲ期,5例Ⅱ期;包括9例IgG型,5例IgA型,2例不分泌型。6例RB-1缺失均处于Ⅲ期;包括4例IgG型,1例IgA型,1例不分泌型。11例D13S319缺失患者中,9例Ⅲ期,2例Ⅱ期;包括9例IgG型,1例IgA型,1例不分泌型。5例P53基因缺失患者中,4例Ⅲ期,1例Ⅱ期;5例均为IgG型。9例IgH基因重排患者中,7例Ⅲ期,2例Ⅱ期;包括5例IgG型,3例IgA型,1例不分泌型。采取χ2检验后5中染色体核型异常与分型、分期之间无明显相关性((P>0.05)。(5)del(13q14)患者β2-MG及骨髓浆细胞比例数均明显高于无缺失患者(P<0.05), IgH基因重排的患者骨髓浆细胞比例数均明显高于无重排患者(P=0.00),达统计学显著差异.结论多发性骨髓瘤的细胞遗传学多为复杂畸形,多同时累及结构和数目的异常。RB-1基因位点缺失和D13S319缺失两种异常共存,del(13q14)和17p13缺失具有密切联系。根据研究中数据初步推断:RB-1、D13S319与P53基因缺失以IgG型和处于Ⅲ期为主。13号染色体缺失和IgH基因的重排的患者,β2-MG及骨髓浆细胞比例数均明显增高,提示两种异常与不良的预后相关。由于本研究中正规治疗的患者较少,未进行有意义的统计学检验细胞遗传学改变和生存时间关系。需进一步扩大样本量进行检测。对于初诊及病程中的MM患者需进行常规染色体和FISH检查,评估其预后,核型异常的患者预后较差,尤其是del(13q14)和17p13缺失患者。
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