基于无机纳米材料组装的信号增强型电化学免疫传感器的研究

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免疫传感器是利用生物体内的免疫反应与电化学分析法结合所构成的一种生物传感器,具有灵敏度高、选择性好、易于微型化、自动化、可进行原位分析和在线活体检测等优点,在临床诊断、环境监测、食品工业、工业分析和生物分析等领域得到了高度重视和广泛应用。构建电化学免疫传感器的关键是生物分子的固定技术和固定材料的选择,并保持生物分子的生物活性和稳定性。纳米材料具有比表面积大、吸附力强、导电性好、生物相容性好等特点。将纳米材料用于构建免疫传感器,用其固载生物分子可在提高生物分子(抗原或抗体)的吸附量和稳定性的同时,很好的保持生物分子的生物活性,从而使得免疫传感器在灵敏度、选择性、稳定性、响应时间和使用寿命等主要性能上得到提高。本文将纳米金、碳纳米管、功能化石墨烯、纳米普鲁士蓝等纳米材料用于构建免疫传感器,并研究了其相应的电化学响应特性。具体工作如下:1、基于金胶和普鲁士蓝的纳米膜修饰碳糊电极制备安培免疫传感器用普鲁士蓝(PB)和金胶(AuNPs)制得高灵敏IgG安培免疫传感器。主要特点有:1、用离子液体(OMIMPF6)(1-丁基-3甲基咪唑,6氟磷酸盐)作为粘合剂,制得离子液体碳糊电极,增加了电极的导电性;2、电沉积普鲁士蓝后,用APS凝胶(3-氨已基-三乙氧基硅烷)覆盖在电极表面进行功能化,对AuNPs有很强的结合能力,形成了具有高催化活性和大比表面积的复合膜,增大了对人免疫球蛋白抗体的吸附量,从而提高了传感器的灵敏度。用电化学方法对修饰过程进行了表征,并对实验条件进了优化。在最佳实验条件下,传感器的响应电流与HIgG的浓度在0.05-1.25ngmL-1和1.25-40ngmL-1范围内呈良好的线性关系,信噪比等于3时,检出限为0.001ngmL-12、用金纳米/多壁碳纳米管-壳聚糖纳米膜修饰玻碳电极制备癌胚抗原电化学免疫传感器的研究用纳米金、多壁碳纳米管(MWCNTs)-壳聚糖(chitosans)复合膜制得癌胚抗原的电化学免疫传感器。AuNPs/MWCNTs-chits复合膜的制备是把氯金酸加入分散好的MWCNTs-chits溶液中,原位制得AuNPs-MWCNTs-chits纳米复合物,然后把复合物滴在玻碳电极表面晾干成膜,再用于固定anti-CEA制得的CEA的免疫传感器。该传感器具有制作简单、成本低、高灵敏度和高选择性等特点。用电化学方法对修饰过程进行了表征,并对实验条件进了优化。在优化条件下,免疫传感器响应电流与CEA的浓度在0.3~2.5ngmL-1和2.5~20ngmL-1范围内呈很好的线性关系,检出限为0.01ngmL-1(S/N=3)。3、氨基功能化石墨烯和金纳米修饰离子液体碳糊电极制备甲胎蛋白电化学安培免疫传感器的研究以离子液体碳糊电极为载体,采用氨基功能化石墨烯和纳米金,构建高灵敏、甲胎蛋白(AFP)免疫传感器。本实验有以下优点:第一,采用室温离子液体作为粘合剂,制备的离子液体碳糊电极具有很好的导电性;第二,氨基功能化石墨烯表面带有正电荷,能大量吸附带负电荷的金纳米粒子,进而提高甲胎蛋白抗体的固定量,提高传感器的灵敏度。传感器制作过程简单方便,具有高选择性、高灵敏度和高稳定性;第三,实验过程中使用纳米金和功能化石墨烯都具有很好的生物相容性、很好的电子传导能力、以及比表面积大和强吸附性等特点,显著放大响应电流,提高检测灵敏度。用电化学方法对修饰过程进行了表征,并对实验条件进了优化。在最佳的实验条件下,该传感器的响应电流与AFP的浓度在1~250ngmL-1范围内呈很好的线性关系,检出限为0.1ngmL-1(S/N=3)
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