论文部分内容阅读
随着生活水平的大幅提高,人们对蛋白来源食物的获取量不断增加。大量研究表明,维生素B6(Vit B6)以辅酶因子的形式参与机体蛋白质和氨基酸代谢。蛋白质是仔猪最重要且常规的营养素之一,日粮蛋白质过高或过低都将对仔猪的健康生长产生不利影响。然而,关于日粮蛋白质和Vit B6互作对断奶仔猪的肠道功能及氨基酸代谢的影响未见报道。本研究旨在以断奶仔猪为模型,探讨日粮中不同Vit B6水平及其与蛋白质水平互作对断奶仔猪生长性能、肠道功能及氨基酸代谢的影响,为断奶仔猪日粮中Vit B6的具体应用和高蛋白饮食人群的健康膳食指导提供参考。实验采用2×3双因素设计,分别为18%、22%两个蛋白质水平和0、4、7 mg/kg三个Vit B6水平。选取36头体重相近(7.03±0.15 kg)的21日龄断奶仔猪[(大约克×长白)×杜洛克]按体重随机分为6个试验组,每组6个重复,每个重复1头猪,饲喂期14天。试验起始称量仔猪体重并记录为初重和末重,期间每天记录采食量和腹泻情况。饲喂试验结束后采集血液、肝脏、肠道、肠道粘膜及肠道内容物样品进行实验室检测分析。试验数据经Excel整理后,通过SPSS 20.0软件进行统计分析,主要研究结果如下:1.不同Vit B6水平对断奶仔猪的生长性能无显著影响(P>0.05),与LP组相比,HP组显著降低了断奶仔猪的采食量(P<0.05)。不同Vit B6水平和蛋白质水平对回肠绒毛高度、绒毛宽度、绒毛面积和Ki67阳性细胞数量存在显著的互作效应(P<0.01)。与LP组相比,HP组显著提高了回肠COX2、TNF-α和TGF-β的m RNA表达(P<0.05)。与LB6组相比,HB6组显著降低了空肠IL-10的m RNA表达(P<0.05),提高了回肠TNF-α、COX2、IL-1β和TGF-β的m RNA表达(P<0.05)。不同Vit B6水平和蛋白质水平对空肠COX2、IL-10、TNF-α、TGF-β和回肠TGF-β、TNF-α、COX2的m RNA表达存在显著的互作效应(P<0.05)。2.与LP组相比,HP组血清尿素氮、游离异亮氨酸、缬氨酸、苯丙氨酸、组氨酸、酪氨酸、亮氨酸、精氨酸和总必需氨基酸的含量显著增加(P<0.05),血清丙氨酸、赖氨酸、丝氨酸、甘氨酸和总非必需氨基酸的含量显著降低(P<0.05);与LB6组相比,HB6组血清缬氨酸和苏氨酸的含量显著增加(P<0.05),MB6组血清脯氨酸的含量显著增加(P<0.01)。与LB6组相比,除脯氨酸之外,HB6组各肝脏水解氨基酸含量均显著下降(P<0.05),不同Vit B6水平和蛋白质水平对肝脏水解酪氨酸的含量存在显著的互作效应(P=0.01)。与LP组相比,HP组回肠水解亮氨酸、苯丙氨酸、脯氨酸、丝氨酸、谷氨酸、甘氨酸、丙氨酸、总非必需氨基酸和总氨基酸的含量显著降低(P<0.05)。与LB6组相比,除酪氨酸之外,HB6组各回肠水解氨基酸含量均显著下降(P<0.05),MB6组回肠水解酪氨酸含量显著增加(P<0.01);不同Vit B6水平和蛋白质水平对回肠水解苯丙氨酸的含量存在显著的互作效应(P<0.05)。与LP组相比,HP组空肠SLC6A20的m RNA表达显著上调(P<0.05)。与LB6组相比,HB6组空肠SLC36A1和SLC38A2的m RNA表达显著下调(P<0.01),空肠SLC38A5和回肠SLC7A7的m RNA表达显著上调(P<0.05);MB6组回肠SLC6A20、SLC7A6和SLC38A5的m RNA表达显著下调(P<0.05)。与MB6组相比,HB6组回肠SLC36A1和SLC38A2的表达显著上调(P<0.05)。不同Vit B6水平和蛋白质水平对回肠SLC38A5、SLC6A20、SLC7A6和SLC36A1的m RNA表达存在显著的互作效应(P<0.05)。3.回肠:门水平上,厚壁菌门(Firmicutes)和变形菌门(Proteobacteria)是回肠微生物的主要细菌门类。属水平上,相对丰度较高的主要菌属包括梭杆菌属(Clostridium_sensu_stricto_1),放线菌属(Actinobacillus),Romboutsia菌属,Turicibacter菌属和乳酸杆菌属(Lactobacillus)。与LB6组相比,MB6组Chao1和ACE指数显著增加(P<0.05);放线菌门(Actinobacteria)和螺旋体门(Spirochaetes)丰度显著增加(P<0.05)。结肠:拟杆菌门(Bacteroidetes)和厚壁菌门(Firmicutes)是结肠微生物的主要细菌门类。属水平上,粪杆菌属(Faecalibacterium),普氏菌属(Prevotella-1/2/9),乳酸杆菌属(Lactobacillus)和瘤胃菌属(Ruminococcaceae_UCG-002/005)是相对丰度较高的主要菌属。与LB6组相比,MB6组shannon指数显著降低(P<0.05),放线菌门(Actinobacteria)和瘤胃菌属(Ruminococcaceae_UCG-005)的丰度显著降低(P<0.05);与LP组相比,HP组巨型球菌属(Megasphaera)的丰度显著降低(P<0.01),异丁酸含量显著增加(P<0.05)。4.回肠黏膜转录组测序结果显示,高蛋白组不同Vit B6组间差异表达基因为1777个,且主要富集于细胞分裂、核酸代谢和酶活调控等生物学过程,与细胞增殖相关。综上所述,高蛋白日粮中补充Vit B6改善了断奶仔猪回肠的形态结构及功能;不同Vit B6水平和蛋白质水平对断奶仔猪回肠的形态结构、细胞增殖、功能及氨基酸代谢具有显著的互作效应。由此表明,高蛋白饮食人群可适当补充Vit B6以改善肠道功能和蛋白质的消化吸收。