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目的：探讨三阴性与非三阴性乳腺癌细胞株之间TUSC5、RASSF1A基因启动子甲基化水平的差异，并分析其与激素受体、HER-2表达的相关性。 方法：运用焦磷酸测序法分析4种三阴性与非三阴性乳腺癌细胞株和1种人类乳腺细胞株中TUSC5、RASSF1A启动子甲基化状态，运用qRT-PCR和Western印迹检测这些细胞株中TUSC5、RASSF1A基因mRNA和蛋白的表达。 结果：1、TUSC5启动子区域的平均甲基化水平在正常乳腺细胞株呈低频率，三阴性乳腺癌细胞株为中等频率，非三阴性乳腺癌则呈高频率。在高甲基化的非三阴性乳腺癌细胞株中，BT-474(ER+、PR+、HER-2+)的甲基化程度最高。 2、RASSF1A基因启动子区CpG在正常乳腺细胞株、三阴性及非三阴性乳腺癌均呈高甲基化，但甲基化水平非三阴性乳腺癌细胞株>三阴性乳腺癌细胞株>正常乳腺细胞株。在高甲基化的非三阴性乳腺癌细胞株中，细胞株MCF-7(ER+、PR+、HER-2-)和BT-474(ER+、PR+、HER-2+)RASSF1A基因启动子区CpG岛甲基化频率接近，分别为89.13％和88.13%。 3、各细胞株TUSC5和RASSF1A基因mRNA均呈阳性表达，各细胞株TUSC5蛋白表达均阳性，表达水平BT-474>MCF-7>MCF-10A>MDA-MB-453>MDA-MB-231。RASSF1A蛋白表达水平为BT-474>MCF-7，其余细胞中该蛋白表达量较低。 结论： 4种乳腺癌细胞株TUSC5、RASSF1A基因启动子甲基化水平与激素受体、HER-2表达呈正相关；三阴性与非三阴性乳腺癌TUSC5、RASSF1A基因启动子甲基化有差异性。乳腺癌的发生可能与TUSC5和RASSF1A基因启动子区高甲基化而导致该基因沉默或部分沉默有关，其发生机制有待进一步研究。