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细胞分裂素作为一类植物激素，在植物体生长发育、抗病、抗逆、营养物质的吸收利用以及叶片衰老中起到重要作用。细胞分裂素的生物合成、代谢及信号转导的研究已经比较详细，但是细胞分裂素转运的分子机制研究尚不清楚。AtABCG14是首个被发现的细胞分裂素长距离转运蛋白，它主要负责将根部合成的细胞分裂素通过木质部运输到地上组织，促进地上组织的生长和发育。AtABCG14是ABC转运蛋白家族的一员，它作为一个半分子转运蛋白，需要与其他蛋白相互作用来完成细胞分裂素的转运。但是目前为止还未有其互作蛋白被报道。 本研究的目的是鉴定AtABCG14的互作蛋白，进而阐明细胞分裂素的转运机制。本文首先是利用免疫共沉淀方法以及液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)获得了与AtABCG14互作的候选蛋白，之后结合分子生物学，遗传学等研究方法鉴定ABCG14的互作蛋白。具体研究结果如下: (1)通过免疫共沉淀和液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)相结合的方法获得了124个目的蛋白，从中选取了26个可能在植物体内与AtABCG14互作的候选蛋白进行后续的验证实验。 (2)将候选基因构建到荧光素酶(luciferase)的N端载体上，同时将AtABCG14基因构建到荧光素酶的C端载体上，把两个载体同时转入烟草中验证候选蛋白与AtABCG14在烟草中的互作。结果显示有15个候选蛋白与AtABCG14在烟草中相互作用。 (3)鉴定出10个候选基因的T-DNA插入突变体，对突变体的表型进行统计，结果发现aha1突变体和abcg36突变体的莲座叶变小，花序减少，茎变矮小，这些表型与abcg14突变体的表型相似，都是细胞分裂素缺失的表型。此外，本研究还用6-BA处理了aha1突变体和abcg36突变体并统计了根长的变化，以此来检测aha1突变体和abcg36突变体对6-BA的响应，结果显示aha1突变体对6-BA不敏感，与abcg14突变体表型相似，abcg36突变体对6-BA敏感，与野生型表型相似。 (4)把AHA1基因、ABCG36基因构建到酵母表达载体pPR3N上，同时将AtABCG14基因构建到酵母表达载体pBT3N上，然后把两个基因构建的载体分别与pBT3N-AtABCG14一起转入到酵母菌株NMY51中验证其互作情况。结果表明AHA1与AtABCG14在酵母中互作，而ABCG36和AtABCG14在酵母中不互作。 (5)通过Pro ARR5∷GUS/aha1和Pro ARR5∷GUS/abcg36转基因株系的GUS染色，检测细胞分裂素报告基因ARR5在aha1突变体和abcg36突变体中的表达，GUS染色结果表明aha1突变体地上组织中的细胞分裂素含量大量减少，而abcg36突变体地上组织中的细胞分裂素减少程度要弱于abcg14突变体。 以上结果表明AHA1蛋白与细胞分裂素的转运存在一定的关系。