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目的：观察Survivin-shRNA对皮肤鳞状细胞癌A431细胞的抑制作用效果，探讨Survivin-shRNA对皮肤鳞癌抑制作用的分子生物学机制。 方法：构建Survivin-shRNA腺病毒载体，筛选最佳干扰序列。将培养好的A431细胞株分为空白对照组、rAd-EGFP阴性对照组、rAd-Survivin-shRNA转染组和Res阳性对照组，倒置荧光显微镜及相差显微镜下观察细胞转染情况及形态；MTT法检测Survivin-shRNA对A431细胞增殖的抑制作用；流式细胞术检测细胞凋亡指数；Real-time PCR法及Western-blot法分别测定细胞Survivin及其下游凋亡执行因子caspase3、7、8、9mRNA及蛋白的表达水平。 结果：经Q-PCR和Western-blot检测，Survivin-sh2干扰效果最明显，选为最佳干扰序列。Survivin-sh2干扰后倒置荧光显微镜下可见细胞形态呈梭形，结构清楚，胞质和胞核均表达绿色荧光蛋白，且转染72h后表达量明显增强；相差显微镜下可见细胞形态发生改变，细胞体积缩小，变圆皱缩，核固缩，折光性减弱，细胞有脱落，悬浮细胞明显增多，提示Survivin-sh2组细胞生长受到抑制，且细胞有一定程度的凋亡或损失；经Survivin-shRNA或Res处理A431细胞，24h，48h，72h细胞增殖均受到抑制，Survivin-shRNA组增殖抑制率分别为（11.89±1.55）%、（25.24±1.81）%、（40.98±2.35）%，Res组增殖抑制率分别为（24.22±4.56）%、（34.12±5.08）%、（64.96±7.21）%，与shNC组（增殖抑制率分别为（3.02±0.78）%、（4.32±3.44）%、（3.29±3.00）%）比较差异均有统计学意义（P＜0.05），随着Survivin-shRNA或Res作用时间的延长，细胞增殖抑制率逐渐增加，呈时间-效应关系；Survivin-shRNA、Res作用于A431细胞，细胞凋亡率明显增高，两组的凋亡率分别为（72.57±20.17）%、（99.23±0.06）%，与空白组（15.43±6.84）%及阴性对照组（22.77±4.1）%相比差异均有统计学意义（P＜0.05）；经Survivin-shRNA或Res处理A431细胞，，Survivin mRNA及蛋白的表达均降低，与空白组及阴性对照组比较，差异均有统计学意义（P＜0.05），Caspase7、8、9mRNA表达量均增高，Caspase3、8、9的蛋白表达量均增高，与空白组及阴性对照组相比，差异均有统计学意义（P＜0.05），而Caspase3mRNA增高，与空白组相比，差异有统计学意义（P＜0.05）。 结论：靶向Survivin-shRNA的抗肿瘤作用是通过促进肿瘤细胞凋亡，抑制肿瘤细胞分裂增殖等实现的，其机制可能与靶向Survivin-sh2可降低SVV的表达，使Caspase8、9活化，后者激活Caspase3，使其蛋白表达增高，从而促使细胞凋亡，而形成的凋亡蛋白又激活P53，从而进一步扩大凋亡效应。