miR-139-3p在胃癌组织中的表达及其对细胞增殖和凋亡的作用

来源 :温州医学院 温州医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:dlj0425jack
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研究背景:胃癌是一种常见的消化道肿瘤,尽管近年来胃癌的发病率有所下降,但在我国胃癌仍是发病率和病死率最高的恶性肿瘤之一。因此寻找到特异性的诊断标记物和高效的靶向药物,对于改善患者预后和提高患者生存率有深远的意义。近年来研究发现的微小RNA(miR)作为一种非编码的内源性RNA,是由18~23个核苷酸构成的单链非编码RNA分子,通过与靶基因mRNA的3端非编码区(UTRs)结合,降解或抑制mRNA的翻译导致靶基因的转录后沉默,从而参与靶基因功能的调节。miRNA参与生命过程中一系列的重要进程,包括早期发育、细胞增殖、分化和凋亡等。进一步研究发现,miRNA的异常表达还与肿瘤的发生发展有着密切关系。因此,以miRNA作为研究切入点,为胃癌的早期诊断和药物靶向治疗开辟了一条新的路径。   目的:研究miR-139-3p在配对胃癌组织和癌旁正常组织中的表达水平,探讨miR-139-3p在胃癌组织中的表达与胃癌患者临床病理特征的相关性,观察miR-139-3p对AGS和SGC-7901胃癌细胞株的增殖和凋亡的作用。   方法:收集38例新鲜胃癌手术切除标本及癌旁正常组织,利用TRIZOL试剂提取总RNA,利用逆转录试剂盒合成cDNA,采用qRT-PCR法检测各个样本中miR-139-3p的表达情况,并分析miR-139-3p的表达与胃癌临床病理特性之间的关系。取对数生长期AGS和SGC-7901细胞接种于6孔板中(细胞浓度2×105个/孔)。按转染试剂盒要求,将miR-139-3p抑制剂Anti-hsa-miR-139-3p miScriptmiRNA Inhibitor(miR-139-3p Inhibitor)作用于细胞,作为实验组;将miScriptInhibitor Negative Control作用于细胞,作为对照组。转染24h后,qRT-PCR检测miR-139-3p的表达水平,MTT法检测miR-139-3p对AGS和SGC-7901胃癌细胞株增殖的影响,流式细胞仪检测细胞凋亡情况。   结果:qRT-PCR结果显示:miR-139-3p在胃癌组织中表达高于癌旁正常组织,其表达升高与肿瘤大小(P<0.05)和部位(P<0.05)相关。胃癌AGS和SGC-7901细胞株转染miR-139-3p抑制剂24h后,实验组的相对表达量显著低于对照组。MTT结果显示:培养24h、48h、72h后,实验组AGS细胞相对增殖率分别为95.3%±2.18%、87.5%±2.04%、83.8%±3.59%(均P<0.05);实验组SGC-7019细胞相对增殖率分别为92.1%±4.22%、85.3%±1.76%、74.7%±3.39%(均P<0.05)。流式细胞仪检测结果显示:实验组AGS细胞的早期凋亡细胞比例较对照组显著增加,差异具有统计学意义。而SGC-7901的早期凋亡细胞比例增加不是很明显。   结论:miR-139-3p在胃癌组织中表达明显高于癌旁正常组织,并与胃癌的肿瘤直径、部位相关。下调miR-139-3p的表达对胃癌细胞株AGS和SGC-7901具有抑制增殖和促进凋亡的作用。  
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