【摘 要】
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肺炎克雷伯菌（Klebsiella pneumoniae）是一种常见机会性病原菌,一定条件下能够引起动物患肺炎、肠炎和败血症等疾病。近年,多重耐药肺炎克雷伯菌的分离率呈增长趋势,增加了临床细菌性感染治疗的难度。麻杏石甘颗粒是麻杏石甘汤的精制制剂,具有抗炎、抗病毒和抗菌等作用,是一种治疗呼吸道感染的传统处方。本研究对雏鸡和产蛋鸡粪便中肺炎克雷伯菌的流行性和耐药情况进行调查分析,并探究麻杏石甘颗粒对多
【基金项目】
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宁夏回族自治区重点研发计划重点项目（编号:2021BEF02041）; 2020-2022年宁夏回族自治区农业重大实用技术推广项目（规模养殖场减抗养殖关键技术开发与示范）
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肺炎克雷伯菌（Klebsiella pneumoniae）是一种常见机会性病原菌,一定条件下能够引起动物患肺炎、肠炎和败血症等疾病。近年,多重耐药肺炎克雷伯菌的分离率呈增长趋势,增加了临床细菌性感染治疗的难度。麻杏石甘颗粒是麻杏石甘汤的精制制剂,具有抗炎、抗病毒和抗菌等作用,是一种治疗呼吸道感染的传统处方。本研究对雏鸡和产蛋鸡粪便中肺炎克雷伯菌的流行性和耐药情况进行调查分析,并探究麻杏石甘颗粒对多重耐药肺炎克雷伯菌分离株的体外抑菌作用,以期为临床用药、动物健康养殖和动物耐药性监测提供理论依据。主要结果如下:（1）鸡源肺炎克雷伯菌的分离鉴定:本研究从宁夏地区某规模化蛋鸡场采集了健康雏鸡和产蛋鸡的粪便共60份,通过特异性基因PCR扩增、VITEK2 Compact全自动生化仪进行菌种鉴定,共分离到48株肺炎克雷伯菌,其中雏鸡源36株（36/36）,产蛋鸡源12株（12/24）,雏鸡分离率高于产蛋鸡。（2）肺炎克雷伯菌分离株耐药性分析以及毒力基因检测:采用微量肉汤稀释法对分离的48株肺炎克雷伯菌进行13种抗菌药物的敏感性试验,结果显示分离菌株对大观霉素、四环素、氟苯尼考、磺胺异恶唑和复方新诺明耐药率分别为79.17%、81.25%、50.00%、72.91%和72.91%,呈高度抗药性。对奥格门丁、头孢类和喹诺酮类药物耐药程度较低,耐药率为14.58～27.08%,所有分离菌株对粘杆菌素和美罗培南敏感。72.92%的菌株表现为多重耐药,其中耐4重的菌株占比最高（22.92%）,最高表现为7重耐药,占10.42%。且雏鸡源分离菌株的耐药水平高于产蛋鸡。采用PCR方法检测分离菌株的耐药基因和毒力基因携带情况,共检出6种耐药基因和4种毒力基因,分别是aad A1、tet A、oqx A、oqx B、bla TEM和qnr B基因,以及uge、wab G、kfu BC和ent B基因。（3）麻杏石甘颗粒对多重耐药肺炎克雷伯菌的抗菌活性:采用微量肉汤稀释法、生长曲线法、棋盘法和实时荧光定量PCR分别测定麻杏石甘颗粒对分离菌株的最小抑菌浓度（MIC）、生长情况、与抗菌药物联合抑菌效果以及耐药基因转录水平的影响。结果表明麻杏石甘颗粒对分离的多重耐药肺炎克雷伯菌具有抑菌活性,可以延缓菌株从迟缓期进入对数生长期,MIC值为125 mg/m L;麻杏石甘颗粒与恩诺沙星联用,呈现协同或相加作用;经麻杏石甘颗粒作用后,肺炎克雷伯菌耐药基因bla TEM、aad A1和tet A的m RNA转录水平呈极显著下调（P＜0.01）,而oqx B和oqx A基因转录水平无显著变化（P＞0.05）。以上研究结果表明,蛋鸡肠道的肺炎克雷伯菌耐药情况较为严重,以雏鸡为主。麻杏石甘颗粒对多重耐药肺炎克雷伯菌具有抑菌能力,且能够降低部分耐药基因的转录水平。
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