【摘 要】
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高等植物花发育的调控是一个复杂而精细的过程，FT和AP1是开花调控网络的两个关键整合因子，近年来的一些研究表明FT基因的产物可以调控AP1表达，进而控制开花。本实验室前期的研究
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高等植物花发育的调控是一个复杂而精细的过程，FT和AP1是开花调控网络的两个关键整合因子，近年来的一些研究表明FT基因的产物可以调控AP1表达，进而控制开花。本实验室前期的研究表明FT会在翻译后水平调控花原基特异性基因AP1的表达。本论文针对FT调控AP1蛋白稳定性的分子机理展开进一步的研究。
本实验首先建立了AP1蛋白的离体表达与降解分析系统，将纯化的MBP-AP1融合蛋白加入拟南芥幼苗的无细胞提取液中反应，然后检测其蛋白水平变化。结果证明MBP-AP1融合蛋白在无细胞提取液中被降解，而其降解过程可以被蛋白酶体抑制剂MG132所抑制，说明AP1蛋白是通过泛素-蛋白酶体途径降解的。FT基因的诱导表达也可以抑制离体与活体测试中AP1蛋白的降解，说明FT基因可能抑制AP1蛋白通过泛素-蛋白酶体途径的降解。本研究通过表达不同区域突变的AP1蛋白，利用同样的方法还证明了AP1蛋白的MADS-box结构域是其可能的泛素化区域，并且AP1蛋白的MADS-box结构域中有多个赖氨酸均可能是被泛素化的位点。最后本研究又通过酵母双杂交构建了pGBKT7-AP1诱饵蛋白表达载体，转化酵母后与拟南芥cDNA文库杂交筛选相互作用蛋白，结果找到了七个和AP1相互作用的蛋白，其中一个ZIP2蛋白属于RING-finger结构域的E3连接酶家族蛋白，此蛋白可能就是介导AP1泛素化的E3连接酶。本研究的结果进一步表明FT基因的诱导表达可以降低ZIP2基因的表达水平，证明FT基因可能通过抑制ZIP2基因的表达来调控AP1蛋白在花原基分化过程中的稳定性。本研究结果也为后续的研究奠定了基础。
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