【摘 要】
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目的：研究三角帆蚌多糖对人肝癌细胞HepG2生长的影响。
方法：提取三角帆蚌多糖，检测蚌多糖絮凝、乳化等化学性质：MTT比色法测定HepG2细胞的增殖能力变化；AO/EB染色法观察HepG
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目的：研究三角帆蚌多糖对人肝癌细胞HepG2生长的影响。
方法：提取三角帆蚌多糖，检测蚌多糖絮凝、乳化等化学性质：MTT比色法测定HepG2细胞的增殖能力变化；AO/EB染色法观察HepG2细胞的形态学变化；PI单染流式细胞术检测细胞周期变化；AnnexinV/PI双染法检测细胞早期凋亡；琼脂糖凝胶电泳测定细胞凋亡DNA片断；RT-PCR方法检测肿瘤相关基因c-myc、bcl-2、cyclinD1、VEGF的mRNA水平变化；免疫细胞化学方法测c-myc、bcl-2、cyclinD1、VEGF的蛋白水平变化；氧敏感性荧光探针DCFH-DA测定细胞内活性氧ROS生成量的变化。
结果：三角帆蚌多糖有絮凝活性，无乳化活性。三角帆蚌多糖对HepG2细胞有增殖抑制作用，25μg/ml、50μg/ml、100μg/ml和200μg/ml四个浓度蚌多糖均显著抑制HepG2增殖能力(P<0.05，P<0.01)。PI单染分析显示蚌多糖可使HepG2细胞阻滞在G0/G1期，且随给药浓度增加，亚二倍体凋亡峰显著增加(P<0.001)。AO/EB染色后，荧光显微镜下观察发现蚌多糖导致HepG2细胞出现凋亡小体，随着给药浓度增大，细胞凋亡率显著升高(P<0.001)。AnnexinV/PI双染检测也显示蚌多糖导致HepG2细胞凋亡，50、100和200μg/ml给药组早期凋亡细胞占总细胞的百分率与对照组相比都有显著性差异(P<0.05)。琼脂糖电泳检测结果显示有凋亡细胞特有的DNA片断化条带。RT-PCR和免疫细胞化学法测定表明蚌多糖可以抑制肿瘤相关基因c-myc、bcl-2、cyclinD1和VEGF的表达。此外，四个给药浓度的蚌多糖作用于HepG2细胞3h、6h、12h、24h、48h、72h后，细胞内ROS生成量都显著增加(P<0.05，P<0.01，P<0.001)。
结论：三角帆蚌多糖明显抑制HepG2细胞的增殖，其机理可能与促进HepG2细胞凋亡有关。
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