论文部分内容阅读
谷胱甘肽-S-转移酶(GST)属Ⅱ相代谢酶，是催化谷胱甘肽(GSH)与亲电子的外源物结合的二聚体酶，并可灭活外源物，促使它们排出体外，它们在人群中呈多态性分布．谷胱甘肽-S-转移酶是一组同工酶超家族，GSTP1(GSTπ)是人体内GST的一种重要的活性亚型，在维持细胞的正常机能中发挥着重要作用．内毒素(endotoxin)是革兰氏阴性菌细胞壁外膜的结构成分之一，其化学本质为脂多糖(lipopolysaccharide，LPS)．LPS主要由O—特异性侧链、核心多糖、脂质A(lipid A)3部分组成，其中lipid A为其毒性中心．在创伤、感染引起的全身炎症反应综合症(SIRS)及脓毒症中，内毒素是引起致死性休克重要的致病因子。有研究表明，SIRS及脓毒症中，自由基释放增加，自由基反应病理性加剧，自由基损伤在SIRS及脓毒症中具有十分重要的作用，主要表现为细胞和组织毒性作用。
GSTP1属于机体内源性蛋白，不会引起免疫原反应，是一种具有临床应用价值的抗氧化剂，在抗肿瘤、抗炎抗氧化等领域具有很高的开发潜力，值得作深入研究。前期的研究显示，GSTP1在细胞水平具有明显的抗炎作用。本文在体外诱导表达并纯化了GSTP1蛋白，利用腹腔注射LPS建立小鼠内毒素休克模型，在整体、组织及细胞水平，研究GSTP1对全身炎症反应综合症(SIRS)的抑制作用及机理进行了研究．其研究结果如下：
1.在LPS刺激30min后给予小鼠GSTP1后能显著提高其存活率。
2.GSTP1能明显降低小鼠血清一氧化氮(NO)的水平，表明GSTP1可抑制内毒素引起的SIRS过程中内源性炎症介质NO的产生。
3.GSTP1能显著抑制LPS导致得肺组织髓过氧化物酶(MPO)的酶活性，表明GSTP1能阻止中性粒细胞向肺组织游走、趋化。
4.在全身炎症反应中，肺是受损严重的组织．GSTP1后能保护肺脏免受损伤，维持肺毛细血管内皮结构的完整及肺泡的正常形态。
5.在SIRS/MODS过程中，肝脏常常是最早受累的脏器之一。实验表明：GSTP1能保护肝脏，能维持细胞正常形态，减少坏死病灶。
6.GSTP1显著抑制鼠类巨噬细胞样细胞(RAW264.7细胞)中诱生型一氧化氮合成酶(iNOS)的大量表达，表明GSTP1能通过抑制iNOs而减少NO的大量产生。
7.GSTP1显著抑制鼠类巨噬细胞样细胞(RAW264．细胞)中环加氧酶(Cyclooxygenase-2，COX-2)表达，表明GSTP1可通过抑制COX-2的表达降低 前列腺素(Prostaglandins，PGs)的生物合成。
8.GSTP1显著抑制鼠类巨噬细胞样细胞(RAW264.7细胞)中p38磷酸化，表明GSTP1可通过阻断p38MAPK通路抑制炎症的发展。
综上所述，GSTP1能够明显抵抗LPS所致小鼠全身炎症反应综合症的发展从而降低小鼠内毒素休克的病死率。本研究为GSTP1在治疗炎症性疾病的应用提供了实验依据。