【摘 要】
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钙调素(CaM)是Ca信号传导系统中极其重要的组成部分,其诸多调节功能是通过与其结合蛋白(CaMBP)的相互作用而实现的.因此钙调素结合蛋白的研究对了解Ca/CaM信号转导系统有重要
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钙调素(CaM)是Ca<2+>信号传导系统中极其重要的组成部分,其诸多调节功能是通过与其结合蛋白(CaMBP)的相互作用而实现的.因此钙调素结合蛋白的研究对了解Ca<2+>/CaM信号转导系统有重要意义.CaMBP-10为该研究组近年在中国大白菜中发现并分离得到的一种新的具有重要生理意义的钙调素内源结合蛋白,在前期研究中克隆得到了CaMBP-10成熟蛋白的cDNA序列.为了深入研究CaMBP-10的细胞定位与功能,最终揭示其与CaM之间的调节机制,我们必须对CaMBP-10进行进一步的分子水平研究.这样就迫切需要得到包括5′非编码区在内的CaMBP-10 cDNA全序列,并对其进行各种分析鉴定.因此,该实验采用了5′-RACE方法去克隆CaMBP-10基因,并成功得到了的包括5非编码区序列在内的CaMBP-10的cDNA全序列.Northern blot分析表明CaMBP-10 cDNA全长654bp,编码117个氨基酸,序列分析显示其N端1-25氨基酸为信号肽,26-117氨基酸为成熟蛋白肽段.Southern blot分析表明在中国大白菜基因组中,编码CaMBP-10的基因为单拷贝基因.在NCBI上进行的序列比对显示它和植物非特异性转脂蛋白(nsLTPs)具有极高的同源性.为了确认CaMBP-10与nsLTPs的关系,我们对纯化的天然CaMBP-10进行了脂质结合活性的相关研究,证明CaMBP-10确实具有脂质结合活性这一nsLTPs的共性,并对CaMBP-10、CaM以及脂质分子之间的关系作了一些探讨.
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