微生物砷代谢机制及其关键功能基因的分析

来源 :中国科学院研究生院 中国科学院大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:dingshilin
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本论文以几种代表性的水生微生物(集胞藻、微囊藻、念珠藻、嗜热四膜虫和莱茵衣藻)为对象,研究了它们对砷的吸收、富集和转化的机理,同时对其中起到关键性调控作用的基因进行了克隆和功能解析。本文的主要结果归纳如下:(1)本研究探讨了集胞藻6803(synechocystis sp.PCC6803)对砷吸收和转化机理。实验结果显示:集胞藻具有较强的砷耐受和富集能力。此外,它还能将As(III)氧化为毒性较低的As(V)来解毒。该藻可以作为去除水生环境中砷的修复材料。(2)本研究证实了三种蓝藻:集胞藻6803(Synechocystis sp.PCC6803)、微囊藻7806(Microcystis sp.PCC7806)和念珠藻7120(Nostoc sp.PCC7120)能产生气态砷。编码三种蓝藻ArsM(亚砷酸甲基转移酶)的基因被克隆,将它们表达在对砷高度敏感的大肠杆菌AW3110(AarsRBC)中能提高细胞对As(Ⅲ)的抗性。两种纯化的ArsM蛋白质(SsArsM,Synechocystis和NsArsM,Nostoc)能够甲基化As(Ⅲ)。(3)本文研究了嗜热四膜虫(Tetrahymena thermophila)对五价砷累积、体内形态配比、释放、砷挥发的特性。研究结果表明:甲基砷为细胞内主要的砷形态。此外,它们还被大量的释放到培养基中。挥发砷的产量随着暴露时间和外部砷浓度的增加而增加。(4)本文考察了莱茵衣藻(Chlamydomonas reinhardtii)对五价砷吸收和转化机制。结果表明:随着砷浓度和处理时间的增加,更多的胞内As(V)被还原为As(Ⅲ)。衣藻的两个砷酸盐还原酶基因(CrACR2.1,CrACR2.2)被克隆并表达在大肠杆菌WC3110(AarsC)中,二者都能恢复细胞对As(V)的抗性。
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