【摘 要】
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目的：建立抗人成骨肉瘤单克隆抗体杂交瘤并对杂交瘤细胞及单克隆抗体特性进行研究。方法：利用我室自建的成骨肉瘤细胞系（OS-9607）免疫BALB／C小鼠，取其脾细胞与骨髓瘤细胞Sp2／0融合，经
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目的：建立抗人成骨肉瘤单克隆抗体杂交瘤并对杂交瘤细胞及单克隆抗体特性进行研究。方法：利用我室自建的成骨肉瘤细胞系（OS-9607）免疫BALB／C小鼠，取其脾细胞与骨髓瘤细胞Sp2／0融合，经筛选和克隆化，制备杂交瘤细胞系，用免疫组化和Western-Blot方法研究杂交瘤细胞分泌的单克隆抗体特性。结果：共筛选出阳性克隆25孔，阳性率为4.1％，选择克隆生长好、特异性强的3孔细胞进行克隆化，培养出2株能持续、稳定分泌抗体的杂交瘤细胞系。其中6E7和5D3株杂交瘤细胞经过100d连续培养，单克隆抗体mAb6E7和mAb5D3分泌稳定、特异性强、效价高，经鉴定mAb6E7为IgG1亚型，培养上清效价为1：100，腹水效价为1：1055，mAb5D3为IgG2a亚型，培养上清效价为1：100，腹水效价为1：106。免疫组化检测结果发现，mAb6E7和mAb5D3相应抗原在成骨肉瘤组织及成骨肉瘤细胞系呈高度表达（80％），mAb6E7和其它恶性骨肿瘤、呼吸、消化系统肿瘤有交叉反应，mAb6E7和mAb5D3与正常组织罕有阳性反应；中度以上染色者占阳性总数的80％以上，mAb6E7主要分布于细胞膜和细胞浆内，mAb5D3主要分布于细胞核上。Western-Blot方法研究结果发现，mAb6E7相对应的肿瘤相关抗原为一小肽，mAb5D3相对应的肿瘤相关抗原分子量为
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