子宫切口瘢痕缺陷临床研究及人脐带间充质干细胞对大鼠切口缺陷修复和预防作用初探

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本文主要从以下几个部分展开论述:  第一章 子宫切口瘢痕缺陷再次妊娠对妊娠结局的影响  目的:  探讨子宫切口瘢痕缺陷(Previous cesareanscar defect,PCSD)再次妊娠对妊娠结局的影响.  方法:  选取2013年10月至2016年09月在暨南大学附属第一医院胎儿医学科行B超检查诊断为子宫切口瘢痕缺陷,并再次妊娠且在本院定期产检最终分娩的孕产妇35例(PCSD组),同时收集35例与其同日分娩的瘢痕子宫非缺陷再次妊娠者(非缺陷组),对两组的临床资料及其新生儿资料进行回顾性分析,分析子宫切口瘢痕缺陷(PCSD)再次妊娠对妊娠结局的影响.  结果:  1.PCSD组新生儿早产发生率高于非缺陷组;PCSD组新生儿出生体重低于非缺陷组;两组孕产妇的新生儿出生时Apgar评分差异无统计学意义.  2.PCSD组分娩孕龄低于非缺陷组,PCSD组子宫下段肌层厚度小于非缺陷组;将两组子宫下段肌层厚度进行分组(≤0.5mm;>0.5~≤1.0mm;>1.0~≤1.5mm;>1.5mm)比较,可见不同水平的子宫下段肌层厚度在两组之间有统计学差异;两组孕产妇分娩间隔年限、分娩方式、分娩时是否临产、先兆子宫破裂、产后出血、PROM、GDM的比较均无统计学差异,但PCSD组先兆子宫破裂发生例数为2例,发生率达到5.7%.  3.PCSD组和非缺陷组中进行试产的孕产妇子宫下段肌层厚度比较,差异无统计学意义.两组中进行试产的孕产妇试产成功率、分娩间隔年限的比较差异无统计学意义.  4.PCSD组和非缺陷组孕产妇,经Person相关分析,尚不能认为子宫下段肌层厚度与分娩孕龄、24h出血量、分娩方式之间有相关关系.  结论:  1.子宫切口瘢痕缺陷再次妊娠时早产发生率增加,分娩孕龄、新生儿出生体重较非缺陷再次妊娠者低.  2.子宫切口瘢痕缺陷再次妊娠可能会增加先兆子宫破裂的风险.  第二章 脐带间充质干细胞对SD大鼠子宫切口瘢痕缺陷修复及预防作用初探  目的:  初步探索SD大鼠子宫切口瘢痕缺陷模型,通过不同方式将WJMSCs移植到模型鼠体内进行治疗,综合评估WJMSCs对SD大鼠子宫切口瘢痕缺陷的治疗和预防作用.  方法:  1.清洁级SD大鼠50只,随机分3组,分别为正常手术组10只,模型对照组20只,模型治疗组20只.正常手术组手术方式为3-0可吸收线连续缝合子宫切口,模型对照组与治疗组手术方式为脂多糖(LPS,1mg/ml,1ml/kg)子宫肌壁注射联合电凝(P:10W)双侧子宫切口,3-0可吸收线间断缝合,初步探索SD大鼠子宫切口瘢痕缺陷模型.  2.制模手术后一个月治疗组随机分A、B两组(各10只)分别用静脉注射0.5ml+阴道灌注0.5ml、单纯阴道灌注1ml的方法将1×106/ml的WJMSCs移植到子宫切口瘢痕缺陷大鼠体内进行治疗和预防,每周一次,连续三周;模型对照组亦分A、B两组(各10只)用上述两种移植方法将生理盐水代替WJMSCs注入子宫切口瘢痕缺陷大鼠体内.  3.每组SD大鼠均于最后一次WJMSCs悬液/生理盐水对照治疗后1周和4周,分别随机处死6只和4只,并留取双侧子宫瘢痕处标本.光镜下观察子宫瘢痕处结构改变,Masson染色观察子宫瘢痕处纤维化情况,肌动蛋白(Actin)免疫组化观察子宫瘢痕处肌层愈合情况,细胞角蛋白(Cytokeratin)免疫组化法观察子宫内膜上皮的修复情况.  结果:  1.模型对照组子宫切口瘢痕区域大量炎性细胞浸润,子宫肌层厚度和肌层Actin的体积密度均显著低于正常手术组,差异有统计学意义;肌层胶原纤维体积密度高于正常手术组,差异亦有统计学意义;且模型对照组的内膜缺陷率显著高于正常手术组.  2.经过WJMSCs治疗,治疗结束后1周和4周,治疗A组、治疗B组的肌层厚度、肌层肌动蛋白体积密度均显著高于模型对照组,肌层胶原纤维体积密度均显著低于模型对照组,差异有统计学意义;而治疗A组、治疗B组分别与正常手术组进行比较,肌层厚度、肌层肌动蛋白体积密度均无统计学差异.  3.无论是治疗结束后1周,还是治疗结束后4周,各组之间将瘢痕区域内膜厚度相互比较,差异均无统计学意义;将各组之间治疗结束后1周和4周的瘢痕区域内膜缺陷率相互比较,可见模型对照组的内膜缺陷率高于正常手术组、治疗A组、治疗B组.  结论:  1.通过感染损伤联合热损伤,可使SD大鼠子宫瘢痕区域肌层严重变薄,肌纤维少见甚至消失,胶原纤维增加,内膜严重中断、不连续.  2.子宫切口瘢痕缺陷大鼠移植WJMSCs后,子宫肌层变厚,肌纤维明显增加,胶原纤维减少,内膜缺陷情况好转,WJMSCs可促进子宫切口瘢痕缺陷大鼠子宫肌层结构和功能性的修复.  3.静脉+局部联合治疗和单纯阴道治疗两种不同的移植方式,对子宫切口瘢痕缺陷大鼠的修复作用无明显区别.
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