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目的：通过细胞及分子生物学试验方法,检测TRAIL联合Ad-UPII-E1A后对膀胱癌细胞体外生长的抑制以细胞凋亡的情况,揭示溶瘤腺病毒对TRAIL细胞杀伤能力的影响,对细胞凋亡的影响,初步探讨相关分子机制,为未来TRAIL与溶瘤腺病毒联合治疗膀胱癌的临床应用提供理论基础。方法：用Ad-UPⅡ-ElA联合TRAIL作用于EJ膀胱癌细胞。细胞生存率测定：通过预试验确定实验所需TRAIL的浓度,生长至对数期的EJ膀胱癌细胞中加入Ad-UPⅡ-E1A及TRAIL继续培养,于加药后24,48,72,96小时后分别用噻唑蓝法(MTT)检测,并计算细胞生存率及抑制率,金氏公式法计算分析协同效应。细胞凋亡分析：按照Apoptosis Assay Kit#2说明书对膀胱癌细胞进行处理后,流式细胞仪观察Annexin V-FITC和PI的荧光信号,激发波长Ex=488nm;发射波长Em=530nm,分析正常细胞,凋亡及死亡细胞分布。提取各处理组总RNA,设计并合成相关引物,根据说明书配置并反转录为目的基因,在PCR扩增仪中反应并得到扩增曲线,推测凋亡相关基因Bax的表达。用caspase3活性检测试剂盒检测caspase3的活性。结果：通过体外细胞毒实验发现,TRAIL联合腺病毒作用组的细胞杀伤效应最明显。细胞生存抑制与药物剂量正相关,并且随着时间的增加,抑制率逐渐增加。TRAIL联合腺病毒对EJ细胞有协同抑制增殖的作用。流式细胞仪分析细胞凋亡的结果显示：联合作用组较单用TRAIL组及单用病毒组的凋亡细胞数目都更多,Real-time PCR检测凋亡相关因子基因的表达情况及Capase3活性检测结果显示,在EJ细胞中,TRAIL联合重组腺病毒组凋亡相关基因Bax及的表达及caspase3的活性均高于TRAIL单独作用组及病毒单独作用组。结论：TRAIL联合Ad-UPⅡ-E1A溶瘤腺病毒治疗具有协同抑制膀胱癌细胞增殖并加强腺病毒诱导细胞凋亡的作用。