小鼠胚胎干细胞Zscan4 SCAN结构域的二聚化激活Zscan4c启动子的活性

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Zscan4基因家族是可以编码包含SCAN结构域、锌指结构(zinc finger motif)的一类蛋白,它们可以在小鼠胚胎干细胞(embryonic stem cells,ESCs)中表达,Zscan4的表达在功能上可以启动二细胞胚胎基因(2-cell-embryo genes)的转录并维持小鼠胚胎干细胞基因组的完整性(genome integrity)。但是,对于位于Zscan4氮端(N-terminus)的SCAN结构域在基因表达调控中所起的作用还尚未清楚。本论文发现SCAN结构域介导的小鼠Zscan4的二聚化可以启动Zscan4c启动子(Zscan4c promoter)的激活。为了详细研究小鼠Zscan4 SCAN结构域的功能,在体外实验中,本论文采用分析型超速离心(analytical ultracentrifugation)的方法跟踪多种已纯化的小鼠Zscan4 SCAN结构域冗余片段(SCAN domain truncations)、单氨基酸突变体在溶液中的存在状态。同时,还在小鼠胚胎干细胞J1中构建了一套由Zscan4c启动子所控制,以荧光素酶基因(luciferase gene)作为报告基因的系统用于检测小鼠Zscan4 SCAN结构域二聚化与Zscan4c启动子的激活之间是否存在相关性。小鼠Zscan4 SCAN结构域氮端部分氨基酸的缺失突变(deletion mutation)以及某些单氨基酸突变可以有效的抑制Zscan4二聚体的形成,并在小鼠胚胎干细胞J1内降低荧光素酶基因的表达。因此,在小鼠胚胎干细胞中,SCAN结构域介导的Zscan4的二聚化对Zscan4c启动子的激活至关重要。
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