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离子通道TRPV1是一种非选择性的阳离子通道,也称为辣椒素受体或者香草酸受体亚型1,调控钙、钠等离子的运输,参与多种肿瘤的生理和病理过程。Capsazepine(CPZ)是瞬时感受器电位离子通道TRPV1的阻滞剂,能特异地抑制辣椒素受体的作用,以及消除骨肉瘤引起的痛觉过敏和阻断钙离子通道等。最新研究表明CPZ还具有抗肿瘤作用,但其在人肝癌Hep G2细胞中的作用,以及联合射线对人肝癌Hep G2细胞的辐射敏感性作用还未见报道。本研究探讨了CPZ诱导人肝癌Hep G2细胞凋亡的作用以及联合射线辐照对人肝癌Hep G2细胞的辐射敏感性效应,该研究是为肿瘤预防和放射治疗提供新靶标和新的生物学干预手段。1、CPZ诱导人肝癌Hep G2细胞凋亡利用不同浓度CPZ处理Hep G2细胞,检测细胞存活率,结果显示CPZ对体外培养的Hep G2细胞有抑制增殖作用,且具有剂量相关性;利用流式细胞术检测细胞周期与细胞凋亡情况,结果显示CPZ可致Hep G2细胞阻滞于G0/G1期,并诱导其凋亡;Hoechst 33258染色法观察细胞凋亡的形态学改变发现,细胞核质皱缩,产生凋亡小体;蛋白质印迹法检测细胞中TRPV1及p53、Bcl-2、Bax凋亡相关蛋白的表达,结果显示CPZ显著下调Hep G2细胞中的TRPV1表达,促进凋亡相关蛋白p53、Bax表达上调和抑凋亡蛋白Bcl-2表达下调。2、CPZ对人肝癌Hep G2细胞的辐射敏感性作用利用0.005μmol/L CPZ联合X射线及12C6+离子束辐照Hep G2细胞,细胞的存活率均显著下降,且CPZ联合X射线与联合12C6+离子束辐照都增强了Hep G2细胞的辐射敏感性;集落形成率由对照组和单纯照射组的100%和(35.56±3.60)%降低到(14.81±2.64)%(P<0.05);荧光染色有明显的凋亡小体出现;Western blot检测发现CPZ联合X射线辐照使凋亡相关蛋白p53、Bax与Caspase-3表达量显著上调,Bcl-2的表达明显降低,而离子通道受体蛋白TRPV1的表达量也显著下降。CPZ联合12C6+离子束辐照引起线粒体中的细胞色素C大量释放。结果提示离子通道TRPV1的阻滞剂CPZ以及联合辐照可能通过激活线粒体介导的内在凋亡通路提高人肝癌Hep G2细胞的辐射敏感性。实验结果初步证明,离子通道TRPV1的阻滞剂CPZ能够诱导人肝癌Hep G2细胞凋亡,并且联合射线辐照能够增强Hep G2细胞的辐射敏感性。