乳腺癌组织中MEG3基因表达及其甲基化的研究

• 作 者: 沈嵛津
• 出 处: 昆明医科大学
• 发表日期: 2014年01期
• 关键词: 乳腺癌 lncRNA MeG3 甲基化

目的通过分析长链非编码RNA基因MEG3在乳腺癌及癌旁组织中的表达水平,应用甲基化特异性PCR(methylation-specific PCR, MSP)技术,分析乳腺癌及癌旁组织中MEG3基因DNA的甲基化状态,探讨MEG3基因DNA甲基化与其表达的关系。方法收集乳腺癌及癌旁正常组织20对,癌旁正常组织选取非同一象限、距离癌组织肿块边缘至少5cm以上的乳腺组织作为癌旁乳腺组织。分别提取总RNA,测定所得RNA纯度及完整性,采用实时荧光定量PCR检测MEG3基因的表达。再取其中10例乳腺癌组织癌旁组织,分别提取基因组DNA,用亚硫酸盐处理,设计相应的甲基化和非甲基化序列引物并行PCR扩增,通过琼脂糖凝胶电泳分析,确定与引物互补的DNA序列的甲基化状态。所得数据进行统计学分析。结果：1.MEG3在乳腺癌组织及癌旁正常组织的表达水平经过实时荧光定量检测,乳腺癌组织中MEG3基因表达显著低于正常组织中MEG3基因表达量,差异有统计学意义P=0.00。2.MSP法检测乳腺癌组织及癌旁组织中MEG3基因DNA甲基化状态。10例乳腺癌组织中出现甲基化9例,未甲基化1例；5例癌旁正常组织中出现甲基化2例,未甲基化3例,P=0.07,差异无统计学意义。3.在乳腺癌组织及癌旁组织中MEG3基因甲基化对MEG3表达的影响。在乳腺癌及癌旁组织中11例出现甲基化的样本MEG3表达量为(7.99±3.34)低于未出现甲基化的4例样本中MEG3的表达量为(12.87±5.69),P=0.07(P>0.05),差异无统计学意义。结论1、MEG3基因在乳腺癌组织中的的表达水平较癌旁组织中明显下调,差异有统计学意义,说明在乳腺癌的发生发展过程中MEG3可能起到类似抑癌基因的作用。2、经MSP法检测乳腺癌及癌旁正常组织中MEG3基因DNA甲基化,发现乳腺癌组织和癌旁组织中MEG3甲基化无明显相关性,提示MEG3基因DNA甲基化与乳腺癌的发生无明确相关关系。3、在乳腺癌及癌旁组织中MEG3基因DNA甲基化状态与其表达无明显相关性,差异无统计学意义,提示MEG3基因DNA甲基化对MEG3的表达影响甚微,可能在乳腺癌的发生、发展中并不受到MEG3基因DNA甲基化的调控。