苦参生物碱类成分抗弓形虫作用的研究

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目的:弓形虫病是由刚地弓形虫引起的一种人兽共患传染病,在全球范围内传播广泛,严重危害人类的健康和畜牧业的发展。虽然传统的弓形虫病治疗药物可以在一定程度上抑制或杀灭弓形虫虫体,但同时也会对机体产生许多的毒副作用。本研究中,我们对三种主要的苦参生物碱类活性成分的抗弓形虫作用效果进行了评估,希望能在植物药资源中找到具有抗弓形虫作用且较低毒性的活性成分,以期为弓形虫病的中药治疗提供新的理论依据。方法:本研究我们充分利用体外细胞增殖实验和体内小鼠感染模型实验,对受试化合物的抗弓形虫作用及其对宿主的保护作用进行了评价。在体外实验中,我们利用CCK-8实验分析了受试药物的细胞毒性及其对弓形虫作用的选择性,通过显微图像直接观察药物治疗后感染细胞的形态变化,并通过台盼蓝染色实验检测各实验组的活细胞比例。在体内实验中,我们用弓形虫RH株感染白色雌性昆明小鼠来构建急性弓形虫感染动物模型,每日灌胃给药,4天后计数小鼠腹腔内弓形虫数目,分析小鼠肝脾指数,同时检测小鼠肝脏中ALT、AST、GSH和MDA的含量,并进一步观察小鼠15天内的死亡情况。结果:体外结果显示,受试药物对HeLa细胞的生长抑制作用与给药剂量有关,呈浓度依赖型,其中,氧化苦参碱和苦参碱抗弓形虫作用的选择性要明显优于槐果碱和螺旋霉素。氧化苦参碱和苦参碱不仅使细胞外弓形虫数量显著降低,同时也改善了被感染细胞的生长状态,增加了细胞的存活数量。体内结果显示,氧化苦参碱和苦参碱均能有效抑制小鼠腹腔内弓形虫的增殖,其治疗效果与高剂量下的螺旋霉素相当。而且,与螺旋霉素相比,两者能维持肝脏和脾脏正常的相对重量,能有效降低被感染小鼠血清内ALT和AST的含量,同时能修复因弓形虫感染所带来的肝脏GSH和MDA含量的变化。此外,经氧化苦参碱和苦参碱治疗后的小鼠存活率也优于螺旋霉素治疗组。结论:本次研究首次证明了氧化苦参碱和苦参碱在体内外具有低毒、高效的抗弓形虫活性,且相比于螺旋霉素,它们对弓形虫感染所引起的肝损伤均起到很好的保护作用。氧化苦参碱和苦参碱有望成为新型弓形虫病治疗药物的候选药物。
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