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嗜水气单胞菌是一种引起水产动物患病的革兰氏阴性条件致病菌,该菌的致病性与其群体感应(Quorum sensing)系统密切相关。乳酸菌可通过产生罗伊菌素、乳酸菌素以及多种酸性代谢产物拮抗多种病原菌和腐败菌的生长繁殖。对于乳酸菌作为群体感应抑制剂(quorum sensing inhibitor,QSI)的研究国内外鲜见报道。本文从传统发酵蔬菜中筛选对嗜水气单胞菌QS具有良好拮抗活性的乳酸菌,并对其抑制QS机理和抑制QS活性物质进行探究,为开发一种抑制嗜水气单胞菌群体感应的乳酸菌生物制剂奠定了基础。主要研究结果如下:1.从传统发酵蔬菜中分离135株乳酸菌,采用滤纸片法从中筛选出6株对嗜水气单胞菌QS具有较强抑制活性的乳酸菌菌株,其中菌株SCT-2的效果最强,经生理生化反应和16S rRNA鉴定为植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)。应用蛋白酶、pH和温度等试验分析菌株SCT-2无细胞上清液(cell free supernatant)抑制嗜水气单胞菌 QS 活性,Lactobacillus plantarum SCT-2 CFS中的活性物质初步判断为细菌素类。2.应用双层琼脂扩散法对菌株SCT-2 CFS抑制嗜水气单胞菌QS作用进行研究,结果表明:8 mg/mL SCT-2代谢产物粗提物可使嗜水气单胞菌蛋白酶和嗜铁素的分泌量各减少27.18%和22.11%,对信号分子AHLs(N-acyl-homoserine lactones)的降解率为32.27%,对嗜水气单胞菌的群集和泳动现象具有明显的抑制效果。3.菌株SCT-2对嗜水气单胞菌生物膜形成的抑制结果表明:乳酸菌和嗜水气单胞菌二者表面均具有疏水性与自动聚集能力,可形成生物膜。将两者共培养后发现菌株SCT-2能有效抑制聚四氟乙烯(PTFE)表面嗜水气单胞菌的生长繁殖。当SCT-2代谢产物粗提物达到8mg/mL时,对嗜水气单胞菌生物膜抑制率为45.16%。4.对菌株SCT-2CFS中抑制活性物质进行分离、提纯及鉴定分析,结果表明:经乙酸乙酯粗提后的产物对嗜水气单胞菌QS的抑制直径为21.96 mm;进一步分级纯化、中度纯化和高效液相色谱分离,4.8 min峰洗脱液对嗜水气单胞菌QS具有抑制作用;经SDS-PAGE分析后该细菌素的分子量在1.0～3.3 ku之间,经质谱分析确定为0.86 ku。