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苹果酸脱氢酶是植物生命活动中的关键酶,它参与细胞的多种生理活动。本课题组(贾晋等2009)通过研究败育花蕾与正常花蕾的基因差异表达推测大白菜苹果酸脱氢酶与花蕾败育可能存在某种关系,但苹果酸脱氢酶基因在大白菜(Brassicacampestrisssp.pekinensis(Lour.)Olsson)生长发育中的功能尚不清楚。因此,本研究以大白菜花蕾败育材料97C16-3为试验材料,克隆得到大白菜苹果酸脱氢酶基因(BrMDH)全长。利用实时荧光定量PCR技术,对BrMDH在大白菜中各组织的表达进行分析。进一步构建了超量表达载体p2301-BrMDH以及干扰表达载体pRNAi-LIC-BrMDH,采用农杆菌介导的方法转化野生型拟南芥,对转基因植株性状进行观察。主要研究结果如下:1、对大白菜苹果酸脱氢酶基因序列分析,发现该基因没有内含子只有一个外显子。2、利用实时荧光定量PCR技术,对大白菜中BrMDH的表达进行分析发现,该基因在正在败育花蕾及花序顶端分生组织的表达量比较高,从正常花蕾到已败花蕾发育过程中BrMDH基因表达量呈现先升高后降低的趋势,说明了 BrMDH异常表达可能与花蕾败育存在密切的关系。3、成功构建了超量表达载体p2301-BrMDH和干扰表达载体pRNAi-LIC-BrMDH,采用农杆菌蘸花法将表达载体成功转入野生型拟南芥,筛选获得了转基因植株。4、通过对BrMDH转基因拟南芥植株性状观察发现,BrMDH很可能与花蕾败育存在密切的关系。通过干扰拟南芥MDH的表达可以导致拟南芥花蕾的败育。另外,MDH对拟南芥侧枝形成,叶片颜色及叶绿素的形成,植株高度,果荚的生长都具有重要的作用。