荧光DNA探针微观结构的研究

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本文通过用CdTe/SiO2复合荧光纳米粒子作为能量供体,特定数目DNA修饰的金纳米粒子作为能量受体,成功观测并初步控制了荧光DNA探针的微观结构。  论文介绍了荧光DNA探针的检测原理和研究现状,并展望荧光DNA探针今后的发展趋势;对新型能量受体量子点(QDs)和能量供体金纳米粒子(AuNPs)的性质、制备方法及其在生物传感器中的应用进行了简单的阐述。  制备了特定数目DNA修饰的金纳米粒子。运用金纳米粒子的曲率效应,选用特定粒径的金纳米粒子;将AuNPs在二水合双(对-磺酰苯基)苯基磷化二钾盐(BSPP)溶液中培养一段时间,提高其稳定性;然后分别与3'端为巯基修饰的单链DNA连接,构成AuNPs修饰的单链DNA;加入DNA链接器,提高DNA在金纳米粒子表面的连接率;加入DNA延长链,控制DNA延长链与AuNPs的比例,得到了特定数目DNA修饰的金纳米粒子。在水相体系中,以巯基丙酸为稳定剂制备了水溶性CdTe量子点。  采用反相微乳液法对量子点进行SiO2的包覆,得到了CdTe/SiO2复合荧光纳米粒子。使用丁二酸酐和硅烷偶联剂对CdTe/SiO2复合荧光纳米粒子表面进行羧基化修饰,成功的将其表面的硅氧基替代为羟基。讨论了丁二酸酐用量对CdTe/SiO2复合荧光纳米粒子羧基化效果的影响。随着丁二酸酐的量增加,CdTe/SiO2复合荧光纳米粒子表面氧元素含量的先增加后降低。在丁二酸酐加入量为0.3g(丁二酸酐与复合荧光纳米粒子的质量比为3∶2)时表面氧元素含量达到了最大,选择该比例实验得到了羧基化的CdTe/SiO2复合纳米粒子。考察了EDC的加入量对CdTe/SiO2荧光纳米粒子表面DNA连接率的影响,发现EDC可以促进CdTe量子点的表面羧基与氨基标记的单链DNA(5'-NH2-DNA)进行反应,取DNA∶EDC=1∶30作为EDC的投入量。  以特定数目DNA修饰的金纳米粒子为能量受体,以氨基DNA修饰的CdTe/SiO2荧光纳米粒子为能量供体,构建荧光DNA探针,实现了控制荧光DNA探针微观结构的目的,成功的得到了能量受体和能量供体数目比为1∶1、1∶2、1∶3的荧光DNA探针的微观结构。得到了微观结构可控的荧光探针,为后续深入研究探针微观结构与宏观监测性能之间的关系奠定了良好的基础。
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