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鲍曼不动杆菌(Acinetobacter baumannii，A.b)是革兰阴性专性需氧菌，广泛分布于自然界和医院环境，常因住院患者机体免疫力低下而继发感染。其分离率在非发酵菌中仅次于铜绿假单胞菌，在革兰阴性菌种排列第四。近年来，随着抗生素的广泛使用，鲍曼不动杆菌的耐药现象日益严重。因此研究鲍曼不动杆菌对常用抗生素的耐药状况及其机制，对治疗由鲍曼不动杆菌引起的感染性疾病和开发新的治疗药物等有重要的指导意义。
目的：分析哈尔滨地区临床分离的鲍曼不动杆菌对临床常见抗生素的耐药特点及耐药机制。
方法：收集鲍曼不动杆菌临床分离株33株，采用K-B纸片法测定全部菌株对21种临床常见抗菌药物的耐药性；常量肉汤稀释法测定鲍曼不动杆菌对环丙沙星和左氧氟沙星的MIC，PCR检测33株鲍曼不动杆菌的gyrA基因和parC基因的喹诺酮类药物耐药决定区(QRDR)存在情况，并对其PCR产物进行纯化后测序，与GenBank中的标准序列比较，分析其突变情况。E-test法测定鲍曼不动杆菌对亚胺培南的MIC值，采用IMP-EDTA纸片协同法进行金属酶(MBLs)表型检测，用PCR法分别扩增碳青霉烯酶基因、ESBL相关基因及AmpC酶基因，分析上述基因阳性细菌与耐药的关系。
结果：对33株鲍曼不动杆菌的耐药性分析显示，细菌耐药率>50％的药物有青霉素类、头孢菌素类(1、2、3代)、单环酰胺类、氯霉素类；但对左氧氟沙星和亚胺培南的耐药率最低，均为12.1％。33株鲍曼不动杆菌中13株为多重耐药株，占39.4％(13/33)；细菌对环丙沙星的MIC值的范围是0.5μg/mL～256μg/mL。对左氧氟沙星的MIC值的范围是0.5μg/mL～16μg/mL。
PCR法扩增获得的gyrA和parC基因的序列分析结果显示，对环丙沙星耐药的8个菌株均有gyrA基因突变(Ser-83→Leu突变8株)和parC基因突变(Ser-80→Leu突变4株，Ser-80→Trp突变3株，Glu84→Gly突变1株)；对左氧氟沙星耐药的4个菌株均有gyrA基因突变(Ser-83→Leu突变4株)和parC基因突变(Ser-80→Leu突变3株，Ser-80→Trp突变1株)；而对环丙沙星敏感株未出现gyrA基因突变和parC基因突变。
其中，parC基因突变(Ser-80→Leu突变)在左氧氟沙星耐药细菌中明显多于敏感菌株(P<0.001)。E-test法结果显示，细菌对亚胺培南的MIC值的范围是0.125μg/mL～32μg/mL。MBLs表型检测结果为阴性，PCR法扩增碳青霉烯酶基因，其中OXA-23基因阳性为4株(12.1％)，未检出IMP、VIM和SIM型金属酶基因。
33株鲍曼不动杆菌中，4株对亚胺培南耐药株OXA-23基因检出率为100％，29株亚胺培南敏感鲍曼不动杆菌中均未检出OXA-23基因，经SPSS16.0统计软件进行卡方检验统计学分析，有统计学意义(P<0.05)。PCR法扩增ESBLs基因结果表明，TEM型ESBLs阳性为14株(42.4％)，PER型为10株(30.3％)，CTX-M-1型有3株(9.1％)，CTX-M-9型有1株(3.0％)；未检出SHV型基因；PCR扩增AmpC酶基因，ADC型阳性率为60.6％(20/33)。
结论：gyrA基因突变和parC基因突变决定本地区临床分离鲍曼不动杆菌对喹诺酮类药物的耐药，并且parC基因突变(Ser-80→Leu突变)可能是决定鲍曼不动杆菌耐左氧氟沙星的主要类型。本地区临床分离鲍曼不动杆菌对亚胺培南耐药可能与OXA-23型碳青霉烯酶的产生有关。对头孢菌素类抗生素的耐药主要由TEM和PER型ESBLs及ADC型AmpC酶介导，并且同一菌株携带两种以上耐药基因的比例较高。
结论：gyrA基因突变和parC基因突变决定本地区临床分离鲍曼不动杆菌对喹诺酮类药物的耐药，并且parC基因突变(Ser-80→Leu突变)可能是决定鲍曼不动杆菌耐左氧氟沙星的主要类型。本地区临床分离鲍曼不动杆菌对亚胺培南耐药可能与OXA-23型碳青霉烯酶的产生有关。对头孢菌素类抗生素的耐药主要由TEM和PER型ESBLs及ADC型AmpC酶介导，并且同一菌株携带两种以上耐药基因的比例较高。