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目的:探讨microRNAs介导的去甲基化抑制胃癌细胞B7-H1的表达方法:流式检测不同浓度5-Aza-Cd处理5天和100u/ml的IFN-γ刺激24小时AGS的B7-H1表达;microRNA芯片检测B7-H1阴性的5-Aza-Cd处理5天和100u/ml的IFN-γ刺激24小时的AGS和B7-H1阳性的仅100u/ml的IFN-γ刺激24小时的AGS两组microRNA表达谱差异,并结合microRNA作用靶点预测软件(TARGETSCAN)筛选出7个候选microRNAs,进一步通过转染microRNAs模拟体和双荧光素酶报告载体筛选出靶向作用于B7-H1mRNA的microRNA;定量PCR检测不同浓度5-Aza-Cd处理5天AGS的microRNA表达和焦磷酸测序检测microRNA上游DNA的CpG岛甲基化状态,统计分析5-Aza-Cd浓度、microRNA表达及microRNA上游DNA的CpG岛甲基化水平之间的关系。结果:随着5-Aza-Cd浓度增加,AGS细胞B7-H1表达逐渐增加;筛选出的miR-152和miR-200b靶向作用于B7-H1mRNA抑制B7-H1基因表达;5-Aza-Cd可促进miR-152和miR-200b的表达;5-Aza-Cd导致miR-152基因上游DNA甲基化水平从15.46%降至0.23%,差异有统计学意义(p<0.05); 5-Aza-Cd使miR-200b基因上游DNA甲基化水平从37.6%降至22.2%,差异有统计学意义(p<0.05)。结论:去甲基化促进miR-152和miR-200b表达并靶向作用于B7-H1 mRNA抑制胃癌细胞表达B7-H1