首发精神分裂症患者肠道菌群与炎性因子的相互作用研究

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目的1.了解首发未用药精神分裂症患者肠道菌群的变化,探讨肠道菌群比例在精神分裂症发病中的可能作用。2.观察首发未用药精神分裂症患者炎性细胞因子的变化,了解精神分裂症患者的免疫状态。3.通过对精神分裂症患者肠道菌群与炎症因子、糖脂代谢等关联性研究,探讨肠道菌群在精神分裂症发病中作用的可能机制。方法1.选取2013年12月至2014年10月就诊于郑州大学第一附属医院精神医学科门诊及住院的精神分裂症患者36例(病例组)和健康对照者30名(对照组)。所有入组的患者在入组当天详细询问病史,进行体格检查和精神学检查,收集一般临床资料,并进行PANSS量表评定,测量身高、体重,计算体重指数(BMI)。2.血清血糖水平通过葡萄糖氧化酶法测定,血清胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白及低密度脂蛋白的水平通过酶色度法测定;细胞因子IL-1β、IL-6、TNF-α的测定采用酶联免疫法(ELISA)。3.粪便细菌总DNA的提取:按照细菌DNA提取试剂盒的说明书进行,并进行紫外分光光度计测定DNA浓度。4.采用实时荧光定量PCR法对粪便组织中的双歧杆菌属、乳酸杆菌属、拟杆菌属进行绝对定量:根据细菌种属的16Sr RNA基因序列,设计细菌种属特异性引物,进行常规PCR反应扩增出目的片段并纯化回收PCR产物,构建标准品质粒。应用SYBR Green I荧光染料,对梯度稀释的标准品和待测样本进行分析,建立标准曲线从而对样本中的双歧杆菌属、乳酸杆菌属、拟杆菌属进行绝对定量。5.采用SPSS 19.0统计软件对实验数据进行分析。计量资料结果以K-S单样本检验是否为正态分布,服从正态分布的以均数±标准差()表示,采用独立样本t检验比较两组间参数;若不服从正态分布的以中位数表示,采用非参数Mann-Whitney U检验。肠道各细菌菌属与糖脂代谢、炎症因子等的相关性经检验符合正态分布的采用Pearson相关分析,不符合正态分布的采用Spearman相关分析。采用卡方检验分析计数资料。以双侧P<0.05表示差异有统计学意义。结果1.病例组与对照组间的年龄、受教育程度、性别和吸烟史方面差异无统计学意义(P>0.05)。2.病例组和对照组间BMI、血糖、总胆固醇、甘油三脂、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白等代谢因子水平差异无统计学意义(P>0.05)。3.病例组的血清炎症因子IL-1β、IL-6、TNF-α水平(52.89±13.75、33.47±14.04、46.61±17.74)ng/L高于对照组(22.42±10.97、14.87±6.45、28.70±13.33)ng/L,差异具有统计学意义(P<0.001)。4.病例组患者粪便内双歧杆菌属含量(6.97±0.75)lg copies/g wet fecals与对照组(7.87±0.68)lg copies/g wet fecals相比含量减少,差异有统计学意义(P<0.001);乳酸杆菌属含量比较无统计学意义(P=0.131);病例组患者粪便内拟杆菌属含量(8.72±1.32)lg copies/g wet fecals与对照组相比(7.53±1.62)lg copies/g wet fecals含量增加,差异有统计学意义(P<0.05);病例组肠道乳酸杆菌/拟杆菌的比值(1.01±0.21)小于对照组(1.24±0.33),差异有统计学意义(P<0.05);病例组双歧杆菌/拟杆菌的比值(0.82±0.17)小于对照组(1.11±0.31),差异有统计学意义(P<0.05)。5.相关分析示病例组患者肠道双歧杆菌属、乳酸杆菌属、拟杆菌属的拷贝数的对数值与FPG、TC、TG、HDL-C、LDL-C、IL-1β、IL-6、TNF-α、BMI均无相关性,差异无统计学意义(P>0.05),病例组的乳酸杆菌/拟杆菌、双歧杆菌/拟杆菌比值与炎症因子及PANSS阳性分、阴性分、一般病理分与总分之间均无相关性,差异无统计学意义(P>0.05)。结论1.首发精神分裂症患者存在肠道菌群的紊乱,肠道菌群比例失调,提示肠道菌群比例失调可能参与了精神分裂症的发病。2.首发精神分裂症患者存在细胞因子介导的免疫紊乱,促炎因子IL-1β、IL-6、TNF-α水平高于正常人。3.肠道细菌的数量可能与精神分裂症患者的血糖、血脂代谢和体内炎症水平现状态无直接关联,肠道菌群比例失调与炎症因子及PANSS总分无明显相关性。
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