论文部分内容阅读
目的：探讨胃癌组织中hsa miR 124a启动子区DNA甲基化状态，Rb及cDK6蛋白的表达情况，miR 124a甲基化状态与Rb、cDK6蛋白表达及胃癌临床病理因素之间的相关性。方法：1、提取手术切除的30例胃癌组织和对直的癌旁组织中的总DNA，将提取出的DNA进行亚硫酸氢盐修饰及纯化，再利用甲基化特异PcR(Ms PcR)方法检测hsa miR 124a启动子区的DNA甲基化状态并进行分析斤；2、用免疫组织化学方法研究Rb和cDK6蛋白在胃癌组织中的表达情况，将这两者与miR 124a的甲基化状态进行相关性分析斤；3、研究这30例胃癌病历的浸润深度、仲瘤分期等临床病理因素并进行计算，将这些临床病理因素与miR 124a的DNA甲基化状态进行相关性分析斤。结果：1、研究30例胃癌组织中hsa miR 124a的甲基化状态，其中8例未检测出甲基化(26．7％)，22例(73．3％)表现出了明显的甲基化。而在22例中检测出17例hsa miR 124a 1阳性、19例hsa miR 124a 2阳性、13例hsa miR 124a 3阳性。总体甲基化率分别为56．7％(17／30)、63．3％(19／30)和43．3％(13／30)。胃癌组织的总体甲基化率为73．3％(22／30)，明显高于癌旁组织的甲基化率10．O％(3／30)(p<O．05)。两者之间的差异有统计学意义(p<O．05)。而三对基因间甲基化和非甲基化的差异没有统计学意义(P>O．05)。2、用免疫组织化学法检测30例胃癌组织石蜡包埋切片中Rb蛋白和cDk6蛋白的表达情况，在检测Rb蛋白时，出现了18例标本强阳性(_一十)，占60．O％；出现了5例阳性(__)，占所有样本的16．7％；3例弱阳性(+)，占10．O％；总体阳性率为86．7％(26／30)。而在检测cDk6蛋白表达情况时，在所有的30例样本中，总体阳性率为80．O％(24／30)，Rb及cDk6的阳性率没有明显差异(P>O．05)。miR 124a的DNA甲基化状态与Rb及cDK6表达三者之间的列联相关系数r值分别为：O．43、O．45及O．54。表明三组资料之间均呈正相关(P<O．025)。3、hsa miR 124a的DNA甲基化与患者的性别、年龄、仲瘤部位、病理类型均无相关性(p>O．05)。但与仲瘤大小(<5cm和≥5cm)，分化程度(中分化和低分化)，淋巴结转移(有或无)及浸润深度(T1、T2、T3、T)密切相关。结论：胃癌组织中hsa miR 124a处于高甲基化状态，这种高甲基化可能通过增强Rb、cDK6蛋白的表达来促进胃癌恶性增殖。