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锌作为机体一种必需微量元素是细胞生长、发育和分化所必需的，基因的表达，核酸的合成、修复及核酸结构完整性的维持都需要锌。锌还以含锌酶和各种锌蛋白的结构形式参与DNA复制、基因表达调控和蛋白质的合成等过程。近年来研究发现锌与细胞凋亡有十分密切的关系。锌与细胞凋亡的关系随着锌浓度的变化而变化，锌不足时可以诱导细胞凋亡，而达到一定浓度的锌又可以抑制由于其他因素诱导的细胞凋亡，但当锌浓度超过一定的限度也可诱导细胞凋亡。本研究探讨了锌与鼠胶质瘤细胞凋亡的关系并初步探讨其机理。主要研究内容及其结果如下： 1．高锌对鼠胶质瘤细胞生存活力的影响。用MTT比色法观察加入不同浓度锌对鼠胶质瘤细胞生长状况的影响，并筛选出合适的锌实验浓度。结果显示：300μmol/L的Zn2+作用24小时后抑制鼠胶质瘤细胞生长。 2．低锌对鼠胶质瘤细胞生存活力的影响。TPEN是Zn2+的特异络合剂，用TPEN络合Zn2+造成低锌环境。用MTT比色法观察不同浓度的TPEN对 弟四军医大学硕士学位论文一鼠胶质瘤细胞的生长影响。结果显示：5 P mol／L的 TPEN作用 24 ’J’时后抑制鼠胶质瘤细胞生长。 3．细胞凋亡及其机理的研究是当前生物学研究的一大热点。随着细胞凋亡研究的深入，锌与细胞凋亡之间复杂的关系也越来越引起关注。目前对低锌诱导细胞凋亡的研究比较透彻，对高锌诱导细胞凋亡的研究较少。本研究观察高ZflZ＼低Zd“作用24 ’J’时后鼠胶质瘤细胞形态并利用琼脂糖凝胶电泳、流式细胞仪等方法检测鼠胶质瘤细胞凋亡的情况。结果表明：门)高Zn》、低 Zn》作用 24小时后透射电镜下有特征性细胞凋亡形态改变。u)高my、低m》作用24小时后鼠胶质瘤细胞DNA呈“梯状”。臼)流式细胞仪检测表明：高 ZnZ“组鼠胶质瘤凋亡细胞百分比为门．6％，低 Znh组鼠胶质瘤凋亡细胞百分比为20．3％，说明高Zn》、低ZnZ“作用24小时后都能诱导鼠胶质瘤细胞凋亡。 4．Wt十53作为关卡基因在DNA受损伤时使细胞停止在GI期，使受损细胞修复或发生细胞凋亡。本研究利用 RTPCR法研究高 Zny、低 Zn卜作用24小时后对鼠胶质瘤细胞t个53mRNA表达的影响，并以6叱ctin为内参照，RTPCR产物电泳后经荧光强度扫描分析示：对照组 t个53川一actin比值是 1．05，高 Zn‘”组 t－P53／fi一actinLL值是 0，低 Zn’“组 wt－p53／日一ac t i n上升至1．36。表明高ZnZ”作用24小日后抑策鼠胶质瘤细胞Wt巾53m洲A表达低Znh作用24 ’J’时后可以使鼠胶质瘤细胞t个53mRNA表达水平升高。